脂肪来源干细胞诱导尿路上皮细胞及其机制的研究
结题报告
批准号:
81070605
项目类别:
面上项目
资助金额:
30.0 万元
负责人:
卢慕峻
依托单位:
学科分类:
H0509.前列腺及膀胱良性疾病
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
陈付国、袁捷、宁红秀、董国勤、周娟、陈其、王浩、张明
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中文摘要
脂肪来源干细胞(ASCs)具有多向分化能力,适合膀胱缺损临床修复。ASCs一种细胞修复膀胱壁全层缺损已解决向平滑肌细胞的诱导,目前研究的关键是向尿路上皮细胞(UC)诱导分化,迄今国内外尚未见相关报道。.本研究通过ASCs与胚胎膀胱间质(EBLM)及UC体内共培养,明确ASCs向UC分化的能力;通过ASCs分别与膀胱间质和上皮细胞的体外共培养,明确ASCs向UC分化的关键因素并探讨其可能的机制。在体外诱导ASCs时,先富集CD34+CD45-的细胞亚群,并利用上述共培养中的优化诱导条件,体外高效诱导ASCs向UC分化,并复合支架材料回植修复自体膀胱壁缺损,利用膀胱局部微环境进一步促进ASCs向UC分化。本课题首次尝试ASCs向UC诱导分化,优化相关诱导条件并探讨其机制;通过细胞分选、优化诱导条件及体内膀胱微环境来提高ASCs向UC分化的效率,为组织工程膀胱修复提供安全可靠的新种子细胞来源。
英文摘要
【背景与目的】.脂肪来源干细胞(ASCs)具有多向分化能力,其作为种子细胞修复膀胱壁缺损已解决向平滑肌细胞的诱导,目前研究的关键是向尿路上皮细胞(UC)诱导分化及其相关机制的探讨。本研究通过ASCs与UC的体内外共培养,明确ASCs具备向UC跨胚层诱导分化的能力,并探讨其相关机制;利用ASCs作为种子细胞复合支架材料修复大面积膀胱壁全层缺损。.【材料与方法】.分别分离和培养ASCs、UC并进行细胞鉴定。采用Transwell隔离共培养体系和UC条件培养液,分别对ASCs进行体外诱导;体内将ASCs和 UC接触共培养;检测诱导后的ASCs表达尿路上皮细胞特异性标记物uroplakin-Ia及uroplakin-II及上皮标志物AE1/AE3;通过体外条件培养及相关因子检测探讨相关机制。将ASCs复合BAMG进行膀胱缺损修复,观察其促进膀胱修复情况;将BAMG大网膜预置后行膀胱缺损修复,探讨大网膜预置对膀胱缺损修复效果的影响;尝试将ASCs复合多孔聚己内酯/壳聚糖支架材料,经大网膜预置后修复大面积膀胱壁全层缺损。.【结果】.经过体内外共培养诱导,部分ASCs可表达uroplakin-Ia、uroplakin-II及AE1/AE3,其表达率随诱导时间延长而增加,表明经过体内外诱导,ASCs可以分化成尿路上皮样细胞。在体外诱导中,条件培养液中TGF-alpha、PDGF-BB等细胞因子可能对ASCs的分化起了重要作用。ASCs复合BAMG比单纯BAMG修复膀胱缺损具有更好的修复效果,提示ASCs能够促进体内膀胱缺损的修复;且BAMG经大网膜预置后,通过增强移植物血管化促进膀胱平滑肌的再生;ASCs复合大网膜预置后的PCL/CS,进一步促进了大面积膀胱缺损的修复。.【结论】.ASCs采用UC条件培养液和Transwell隔离共培养的体外诱导方式及与UC体内接触共培养,均能诱导ASCs向UC分化。相关旁分泌和自分泌的细胞因子是促进其诱导分化的关键因素。ASCs能促进单纯BAMG支架修复膀胱缺损效果。支架材料通过大网膜预置,能够促进移植物快速血管化进而促进膀胱平滑肌再生。复合ASCs的预置后多孔支架材料能够修复大面积膀胱缺损。
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Unsatisfactory outcomes of prolonged ischemic priapism without early surgical shunts: our clinical experience and a review of the literature.
长期缺血性异常勃起而不进行早期手术分流的结果不令人满意:我们的临床经验和文献综述。
DOI:10.1038/aja.2012.63
发表时间:2013
期刊:Asian Journal of Andrology
影响因子:2.9
作者:Da-Chao Zheng;Hai-Jun Yao;Ke Zhang;Ming-Xi Xu;Qi Chen;Yan-Bo Chen;Zhi-Kang Cai;Mu-Jun Lu;Zhong Wang
通讯作者:Zhong Wang
DOI:--
发表时间:2011
期刊:国际外科学杂志
影响因子:--
作者:张明;卢慕峻;王忠
通讯作者:王忠
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中华临床医师杂志(电子版)
影响因子:--
作者:周哲;吴稼晟;张明;赵阳;周娟;李伟;王忠;孙康;卢慕峻
通讯作者:卢慕峻
DOI:--
发表时间:2013
期刊:组织工程与重建外科
影响因子:--
作者:周哲;张明;吴稼晟;李伟;孙康;王忠;赵阳;卢慕峻
通讯作者:卢慕峻
Differentiation of Human Adipose-derived Stem Cells Co-cultured With Urothelium Cell Line Toward a Urothelium-like Phenotype in a Nude Murine Model
人脂肪干细胞与尿路上皮细胞系共培养,在裸鼠模型中向尿路上皮样表型分化
DOI:10.1016/j.urology.2012.10.030
发表时间:2013-02-01
期刊:UROLOGY
影响因子:2.1
作者:Zhang, Ming;Peng, Yubing;Lu, Mujun
通讯作者:Lu, Mujun
脐带间充质干细胞微囊联合低能量冲击波治疗神经损伤性ED的机制研究
  • 批准号:
    82371631
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    49.00万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    卢慕峻
  • 依托单位:
脂肪干细胞外泌体复合DNA水凝胶治疗糖尿病勃起功能障碍的机制研究
  • 批准号:
    82171611
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    52万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    卢慕峻
  • 依托单位:
褪黑素预处理细胞外囊泡治疗神经损伤性勃起功能障碍的机制研究
  • 批准号:
    81971376
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    卢慕峻
  • 依托单位:
人沃顿胶间充质干细胞来源微囊促进组织工程膀胱神经再生和功能重建的实验研究
  • 批准号:
    81670622
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    卢慕峻
  • 依托单位:
脂肪来源干细胞复合聚己内酯-壳聚糖促进膀胱修复快速血管化条件优选及其机制研究
  • 批准号:
    81370860
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    卢慕峻
  • 依托单位:
国内基金
海外基金