本课题是基于前期实验结果显示A族链球菌（GAS）诱导RAW264.7细胞产生的细胞因子（IL-1、 IL-6、TNF-α）及趋化因子（MCP-1、CCL-5）与同为革兰氏阳性菌的葡萄球菌（SA）比较呈现表达低下或产生高峰迟滞现象，其反应更接近于革兰氏阴性的大肠杆菌。同时发现热灭活的GAS刺激RAW264.7细胞诱导产生的TNF-α明显高于活GAS，甚至高于SA。由此提示GAS的某些菌体蛋白可能通过某些机制导致RAW264.7细胞活化或产生细胞因子受到抑制。在研究中我们发现在GAS刺激作用下，RAW264.7细胞中对细胞因子产生具有负反馈调节作用的蛋白A20表达增加，A20是一种对TNFR及TLR途径反应有调节作用的泛素化酶，TRAF6是A20 的直接作用底物，TRAF6的加速降解从而使NF-κB信号通路被阻断，炎症因子表达下降。因此本研究的重点放在了探讨GAS以及GAS蛋白成分影响A20蛋白表达和调节。获得的结果显示GAS刺激RAW264.7细胞后负调节蛋白A20的表达较E.coli刺激组显著升高，而其下游作用分子TRAF6较E.coli刺激组明显减少。进一步我们构建了GAS的基因自杀质粒pFW5-SpeB与pFW5-M，电转获得SpeB-GAS、M-GAS基因缺失菌。将不同菌株作用于RAW264.7细胞，结果显示与野生GAS相比，M-GAS可使RAW264.7细胞A20表达下降，而SpeB-GAS使A20表达增加。应用纯化的M蛋白作用于RAW264.7细胞也证明了M蛋白可增加A20表达的作用。不同菌株作用于RAW264.7细胞，炎症因子表达也呈现了差异， M-GAS 刺激组致使炎症因子IL-β、IL-6表达上调，这与M-GAS致A20表达水平降低，对炎症反应的抑制作用减弱一致。SpeB-GAS刺激组对IL-β、IL-6、TNFα表达未见明显影响，细胞因子水平均接近野生GAS刺激组，相关机制有待进一步研究。