低温胁迫下番茄叶绿体DnaJ蛋白的功能分析

研究了番茄叶绿体DnaJ蛋白基因（LeCDJ1）的功能。① 分析了该基因的表达特征，构建了正义、反义表达载体，获得转基因番茄植株。② 酵母双杂交结果显示LeCDJ1可以与叶绿体定位的cpHsp70互作。③ 构建了原核表达载体，表达融合蛋白，制备抗体。④ Western杂交和BN-PAGE分析表明，低温处理后转正义基因番茄的D1蛋白含量以及类囊体膜上的PSII复合体的稳定性较高。D1蛋白合成抑制剂硫酸链霉素处理的转正义基因番茄的Fv/Fm、D1蛋白含量及PSII复合体的稳定性依然比SM未处理的野生型高，说明LeCDJ1对于PSII的保护作用至少不仅仅依赖于D1蛋白的从头合成。⑤ 此外，高温胁迫条件下，过表达SlCDJ2番茄植株具有较高的CO2同化速率、Rubisco活性和Rubisco大亚基含量。蛋白水解酶活性检测显示，高温处理后反义植株水解酶活性明显高于WT和正义植株，说明SlCDJ2可能通过维持较低的蛋白水解酶活性来缓解Rubisco的降解速度，进而缓解高温胁迫对光合作用的抑制作用。