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基于线粒体氧化应激反应调控PGC-1α/ERRα1信号通路探讨健脾益肾强骨针法干预骨质疏松性髋骨骨折的分子机制

批准号:
82060895
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
赵荣
依托单位:
学科分类:
中医针灸学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
赵荣

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
活性氧(ROS)诱导的氧化应激是骨质疏松症(OP)的重要发病机制,其中线粒体损伤引发的应激信号传导作用关键。前期研究证实健脾益肾强骨针法能通过同时提升股骨和股四头肌的力学性能而干预OP性髋骨骨折的发生,其中股四头肌抗外力能力提升发挥主要作用,研究还发现针刺不是通过改变股四头肌的宏观结构,而是通过改变微观结构达到功能的改善,骨骼肌线粒体可能是针刺的关键作用靶点。为进一步探索针刺是否主要通过骨骼肌细胞线粒体氧化应激引发PGC-1α/ERRα1信号通路而起到同时影响骨骼肌微结构和由成骨细胞/破骨细胞主导的骨代谢,拟以OP模型大鼠施以健脾益肾强骨针法,采用Western Blot、RT-qPCR等实验技术,通过检测骨骼肌线粒体呼吸复合物和PGC-1α/ERRα1通路中相关蛋白的表达,揭示健脾益肾强骨针法干预OP性髋骨骨折的分子机制,形成力学性能--形态学--细胞学--分子学完整的针刺效应作用途径。
英文摘要
Abstract: Oxidative stress induced by ROS is an important pathogenesis of osteoporosis (OP), in which stress signaling caused by mitochondrial damage is critical. Previous studies have confirmed that Spleen- Invigorating,Kidney- Tonifying and Bone- Reinforcing Acupuncture Method can interfere with the occurrence of OP hip fractures by simultaneously improving the mechanical properties of the femur and quadriceps, and the improvement of the quadriceps' ability to resist external forces plays a major role. The study also found Acupuncture does not change the macrostructure (wet weight, volume) of the quadriceps muscles, but improves the function by changing the microstructure (muscle cells). Among them, skeletal muscle mitochondria may be the key target of acupuncture. In order to further explore whether acupuncture mainly induces PGC-1α / ERRα1 signaling pathway through mitochondrial oxidative stress of skeletal muscle cells, it affects both skeletal muscle microstructure and bone metabolism dominated by osteoblasts / osteoclasts, We planned to castrate female rats, apply Zu Sanli, Shen Shu, Da Zhu as the main points, Spleen- Invigorating,Kidney- Tonifying and Bone- Reinforcing Acupuncture Method with twisting and tonifying method, use Western Blot, RT-qPCR and other experimental techniques by detecting the expression of skeletal muscle mitochondrial respiratory complex and related proteins in PGC-1α / ERRα1 pathway. The molecular mechanism of Spleen-Invigorating,Kidney-Tonifying and Bone-Reinforcing Acupuncture Method intervention for OP hip fractures was revealed to form: mechanical properties—morphology—cells Science—molecular science complete acupuncture effect pathway.
目的:在前期研究基础上,从骨骼肌线粒体氧化应激角度进一步揭示健脾益肾强骨针法干预OP性髋骨骨折的分子机制,形成力学性能-形态学-细胞学-分子学完整的针刺效应作用途径。方法:采用去势术用SD雌性大鼠建立OP动物模型,造模成功后,设立空白组、模型组、药物组和针刺组,治疗组于造模成功后开始干预,持续12周。治疗结束后,应用micro-CT、透射电镜、力学试验机、Western Blot、PCR等技术,检测股骨和股四头肌的组织形态学和功能,观测线粒体氧化应激水平及PGC-1α/ERRα1通路中相关分子的表达。结果:采用micro-CT检测骨微结构表明,针刺治疗显著恢复了OVX诱导的OP大鼠的骨丢失;采用三点弯曲试验检测股骨弹性表明,针刺治疗改善了OVX大鼠骨的生物力学特性;采用自制重力设备检测在体、离体股骨骨折最小外力表明,在骨质疏松状态下即使有肌肉的包裹和保护,其承受外力的能力也明显减小,而针刺逆转了OVX诱导的OP大鼠的在/离体股骨骨折最大外力减小;采用ELISA检测血清骨转换及骨平衡指标检测表明,针刺治疗恢复了部分骨平衡指标的表达,抑制了OVX诱导的骨转换;采用ELISA检测血尿钙磷水平表明,针刺治疗能维持OVX大鼠体内血清和尿液钙磷代谢平衡;采用激光多普勒循环血流监测仪检测股四头肌微循环血流表明,针刺能明显改善股四头肌微循环血流,提高股动脉平均血流,增大股动脉收缩期最大峰值流速,增加股四头肌血流供应,改善股四头肌微循环血流灌注;采用透射电镜股检测股四头肌微结构表明,针刺治疗可显著改善OVX大鼠股四头肌细胞线粒体损伤;采用DHE染色及ELISA检测肌细胞线粒体及氧化应激情况表明,针刺治疗可明显减轻去势手术诱导的OP氧化应激反应;采用Western blotting法和q-PCR法检测大鼠肌组织中PGC-1α、NRF1、TFAM、FNDC5和irisin的表达水平,PGC-1α在骨髓组织中的表达与大鼠BMD呈显著正相关(r=0.8957,P<0.0001)。结论:针刺能通过降低股四头肌组织线粒体中ROS的表达,改善线粒体氧化应激,调整骨代谢微环境,扭转骨高转换状态,揭示了针刺对肌骨系统的效应作用可能与骨骼肌中线粒体合成途径PGC-1α及其下游信号分子有关。
逆针灸干预DMBA诱发SD雌性大鼠乳腺癌癌前病变的作用机制
  • 批准号:
    81760896
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    36.0万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    赵荣
  • 依托单位:
从肌纤维微结构及力学性能探讨健脾益肾强骨针法预防骨质疏松性髋骨骨折的作用机制
  • 批准号:
    81560799
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    41.0万元
  • 批准年份:
    2015
  • 负责人:
    赵荣
  • 依托单位:
健脾益肾强骨针法对实验性骨质疏松大鼠股骨硬度和弹性的影响
  • 批准号:
    81102658
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    赵荣
  • 依托单位:
国内基金
海外基金