Functions and mechanisms of ribosome-associated chaperones in Saccharomyces cerevisiae

在艾伦Zellen must die Faltung neusynthetisierter Proteine durch ein Netzwerk von Chaperonen unterstützt韦尔登.在这个网络中，有一个伴侣，一个新的蛋白质的第一个伙伴，我们在新的蛋白质中扮演一个小角色。在Bakterien中，核糖体形成相关的伴侣触发因子（TF）很容易被发现，在两种核糖体形成相关的系统中，它们不需要Bakteriellen TF，一种Hsp 70/40-伴侣系统（Hefe Ssb/RAC heißt）和潜在的伴侣系统NAC（新生多肽相关复合物）。从酿酒酵母的功能、作用机理和结构特征来看，酿酒酵母的主要代谢产物是Antrags、NAC和Ssb/RAC。韦尔登我们（i）在体内和体外新蛋白质转化中对NAC和Ssb/RAC的作用及其底物的鉴定，（ii）评估NAC和Ssb/RAC对核糖体的亲和性，以及NAC和Ssb/RAC与翻译机械师的相互作用，（iii）我们发现，ob NAC und Ssb/RAC gleichzeitig oder nacheinander mit Ribosomen und wachsenden Proteinketten assoziieren und ob diese Wechselechtungung für die Faltung und Aktivität von Modellproteinen wichtig ist，und schließlich（vi）anstreben，NAC和Ssb/RAC的三维结构，以及与其他核糖体的关联，我们将与Nenad Ban教授（ETH Zürich）一起进行Röntgen-Kristallographie和Cryo-Elektronenmikroskopie einsetzen。

In allen Zellen muss die Faltung neusynthetisierter Proteine durch ein Netzwerk von Chaperonen unterstützt werden. In diesem Netzwerk sind Chaperone, die mit dem Ribosom assoziieren, die ersten Kontaktpartner der neuen wachsenden Proteinketten, weshalb man diesen Chaperonen eine Schlüsselrolle in der de novo-Proteinfaltung zuschreibt. Während in Bakterien das ribosomenassoziierte Chaperon Trigger Factor (TF) gut beschrieben ist, sind in Eukaryonten die zwei ribosomenassoziierten Systeme, die nicht mit dem bakteriellen TF verwandt sind, ein Hsp70/40-Chaperonsystem (das in Hefe Ssb/RAC heißt) und das potenzielle Chaperonsystem NAC (nascent polypeptide-associated complex), kaum verstanden. Das Hauptziel dieses Antrags besteht darin, NAC und Ssb/RAC aus Saccharomyces cerevisiae funktionell, mechanistisch und strukturell zu charakterisieren. Zu diesem Zweck werden wir(i) die Rolle von NAC und Ssb/RAC bei der de novo Proteinfaltung in vivo und in vitro untersuchen und ihre Substrate identifizieren,(ii) bestimmen, wie hoch die Affinität von NAC und Ssb/RAC für translatierende Ribosomen und wie dynamisch die Wechselwirkung von NAC und Ssb/RAC mit der Translationsmaschinerie ist,(iii) herausfinden, ob NAC und Ssb/RAC gleichzeitig oder nacheinander mit Ribosomen und wachsenden Proteinketten assoziieren und ob diese Wechselwirkung für die Faltung und Aktivität von Modellproteinen wichtig ist, und schließlich(vi) anstreben, die dreidimensionalen Strukturen von NAC und Ssb/RAC einzeln und in Assoziation mit translatierenden Ribosomen aufzuklären, indem wir in einer Zusammenarbeit mit Prof. Nenad Ban (ETH Zürich) Röntgen-Kristallographie und Cryo-Elektronenmikroskopie einsetzen.