Entkopplung der Expressionsregulation der Basalmembran-Komponente Laminin-5: Funktionelle Konsequenzen eines Smad4 Verlustes

Smad 4是一种肿瘤抑制因子，它的功能是抑制肿瘤的发生，包括肿瘤的侵袭和转移。我们建立了Smad 4在结肠癌和胰腺癌组织中的表达模型，并在体内观察到Smad 4的肿瘤抑制功能，从而使Smad 4能够促进血管生成和侵袭性特征性韦尔登形成。我们已经发现，Smad 4是所有三个基因阳性的信号传递和转录因子，对层粘连蛋白-332（Laminin-5）编码。层粘连蛋白-332是基底膜的主要成分，也是异源三聚体。一个肿瘤侵袭性前线发现层粘连蛋白-332的γ 2-Kette在细胞内表达非常愤怒，在此之前，表达调控与肿瘤间质信号的遗传学检测结果一致。Smad 4阳性的Zellen，通过TGF-β和TNF-α的协同作用，对层粘连蛋白-332的三种诱导作用，在Smad 4阴性的Zellen中，对这种典型的细胞信号的抑制作用是：当β 3和γ 2也被Smad 4阴性的Zellen激活时，TNF- α对α 3的诱导作用也被Smad 4抑制。因此，我们必须认识到，Smad 4阴性的Zellen患者中的这种调节作用并不明显。nicht nachweisbar）zur intrazellulären Anreicherung der gamma2 Kette，sondern zur Freisetzung als Mührt.在这个项目中，我们需要了解伽马2自由能的功能。因此，本研究将肿瘤与TNF-α和炎性细胞因子的相关性与Smad 4的相关性进行了比较，并对韦尔登进行了治疗。

Smad4 ist ein Tumorsuppressor, dessen funktionelle Inaktivierung während der Karzinogenese insbesondere des Pankreas und des Darmtraktes häufig den Übergang zum invasiven und zum metastatischen Wachstum markiert. Durch Reexpression von Smad4 in defizienten Kolon- und Pankreaskarzinomzellen haben wir Modelle etabliert, mit denen die Tumorsuppressorfunktion von Smad4 in vivo nachgewiesen und eine Smad4-vermittelte Unterdrückung angiogener und invasiver Eigenschaften gezeigt werden konnte. Kürzlich haben wir gefunden, dass Smad4 als Signaltransmitter und Transkriptionsfaktor alle drei Gene positiv reguliert, die für Laminin-332 (Laminin-5) codieren. Laminin-332 ist eine Hauptkomponente von Basalmembranen, die als Heterotrimer sezerniert wird. An der invasiven Front von Tumoren findet sich dagegen die gamma2-Kette von Laminin-332 häufig intrazellulär stark angereichert, ein Befund, der als entkoppelte Expressionsregulation als Antwort der genetisch veränderten Tumorzellen auf Signale des Tumorstromas gewertet wird. Smad4-positive Zellen, die mit den Zytokinen TGF-β und TNF-α behandelt werden, zeigen eine gleichsinnige synergistische Induktion aller drei Ketten von Laminin-332, in Smad4-negativen Zellen dagegen ist die Antwort auf diese typischen Stromasignale entkoppelt: Während die beta3 und gamma2 Ketten auch von Smad4-negativen Zellen verstärkt exprimiert werden, ist die Induktion der alpha3 Kette durch TNF- α von Smad4 abhängig. Überraschenderweise konnten wir zeigen, dass diese entkoppelte Regulation in Smad4-negativen Zellen nicht (bzw. nicht nachweisbar) zur intrazellulären Anreicherung der gamma2 Kette, sondern zur Freisetzung als Monomer führt. In diesem Projekt möchten wir konkret die funktionellen Konsequenzen der gamma2 Freisetzung untersuchen. Darüber hinaus soll die Relevanz veränderter zellulärer Antworten von Tumorzellen auf TNF-α und andere inflammatorische Zytokine nach Verlust von Smad4 weiter adressiert werden.