Modulation der Aktivität des Virulenzregulators PrfA von L. monocytogenes durch PTS-Permeasen

PrfA, der zentrale tranriptionsaktivator fgr - 1，与单核增生李斯特菌的病毒酶相关，在seiner synthesis和Aktivität在复合菌Weise regulert。Während die Mechanismen, die auder transcripptions - and Translationsebene, die Expression von PrfA stesten, weitgehend bekant, ist die Frage and die Aktivität des PrfA- proteins in Abhängigkeit von Wachstumsbedingungen modulliert wind, noch weitgehend unveren。Zahlreiche Untersuchungen der vergangenen Jahre haben gezeigt, ass Kohlenhydrate, die ber Phosphoenolpyruvat-abhängige phosphotransferase - system (PTS) aufgenome werden, zu einer starken Hemmung der PrfA-Aktivität fhren。Wir konnten zeigen, dass weder der Komponenten des allgemeinen PTS Grundzweiges (El, HPr, HPr- his - p), noch die der Kohlenstoff-Katabolit-Repression (CcpA and HPr- ser - p) ederekten Einfluss auf die PrfA-Aktivität auszweigen。Unsere in L. monocytogenes durchgef<s:1>在体内hrten Untersuchungen zeigten vielmehr， dass die PrfA-Aktivität mit dem phospylierungsgrad bestimmter pts - permeen korreliert。Alle Ergebnisse dieser Untersuchungen sind in Einklang mit der Hypothese, dass die dephosphoryliten ENA Komponenten dieser Permeasen zur Hemmung der PrfA Aktivität f<e:1> hren, während die phosphoryliten EllA Komponenten diese Hemmung entder autheder PrfA direct aktivien。In dem vorliegenden Antrag soll diese hypothesis这些interseits durch weitere在体内，在L单核细胞增生细胞EGDe Wildstamm和geeigneten突变体gestten和anderseits die mögliche直接Interaktion von PrfA和den gereinigten EllA (bzw。pts - permeen生物化学nachgewiesen werden。

PrfA, der zentrale Trankriptionsaktivator für die wichtigsten Virulenzgene von Listeria monocytogenes, wird in seiner Synthese und Aktivität in komplexer Weise reguliert. Während die Mechanismen, die auf der Transkriptions- und Translationsebene die Expression von PrfA steuern, weitgehend bekannt sind, ist die Frage wie die Aktivität des PrfA-Proteins in Abhängigkeit von den Wachstumsbedingungen moduliert wird, noch weitgehend unverstanden. Zahlreiche Untersuchungen der vergangenen Jahre haben gezeigt, dass Kohlenhydrate, die über Phosphoenolpyruvat-abhängige Phosphotransferase-Systeme (PTS) aufgenommen werden, zu einer starken Hemmung der PrfA-Aktivität führen. Wir konnten zeigen, dass weder die Komponenten des allgemeinen PTS Grundzweiges (El, HPr, HPr-His-P), noch die der Kohlenstoff-Katabolit-Repression (CcpA und HPr-Ser-P) einen direkten Einfluss auf die PrfA-Aktivität ausüben. Unsere in L. monocytogenes durchgeführten in vivo Untersuchungen zeigten vielmehr, dass die PrfA-Aktivität mit dem Phosphorylierungsgrad bestimmter PTS-Permeasen korreliert. Alle Ergebnisse dieser Untersuchungen sind im Einklang mit der Hypothese, dass die dephosphorylierten ENA Komponenten dieser Permeasen zur Hemmung der PrfA Aktivität führen, während die phosphorylierten EllA Komponenten diese Hemmung entweder aufheben oder PrfA direkt aktivieren. In dem vorliegenden Antrag soll diese Hypothese einerseits durch weitere In vivo Versuche in L monocytogenes EGDe Wildstamm und geeigneten pts Mutanten gestützt und andererseits die mögliche direkte Interaktion von PrfA mit den gereinigten EllA (bzw. EIIB) Komponenten dieser PTS-Permeasen biochemisch nachgewiesen werden.