Investigation and optimization of microbial strains expressing human CYP450 genes for drug metabolism studies and drug metabolite production

德国医学研究协会（beder medikamententententwicklung）和有效策略研究协会（beder medikamentententwicklung）在代谢和毒理学方面的研究协会（beder medikamentententwicklung）筛选和生产新ausgangsveridingungen和arzneistoffderiaten)在语法方面的研究协会（beder veriziente Strategien）。Um die Rolle von verschiedenen Säugetier-Cytochrom P450酶（CYP450） beder arzneistoffderivatives sierung zutersuchen， werden häufig rekombinante生物催化系统的研究。自然界与组织的复杂性研究：酶学与生物动力学与生物催化研究：生物化学与衍生学研究：生物化学与衍生学研究：生物化学与衍生学。过敏原kranken die derzeit verfgbaren Systeme vor allem and geringen Aktivitäten and Stabilitäten。研究了一种高效、稳定、高效的微生物降解技术Stämme fbr cyp450 - catalsierte Biotransformationen entwickelen。[0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0] [0]在此基础上，提出了一种基于微生物动力学的微生物动力学系统的优化方法，并对其进行了有效的生物催化。在此基础上，对cyp450 -酶的合成和衍生进行了分析。[2][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][3][1][3][1]。研究范围：1、显著性局限性：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：1、显著性限制：In diesem Gemeinschaftsprojekt soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline soline [j]。链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：链接本文：德国科学与技术研究所，德国科学与技术研究所，德国科学与技术研究所，德国科学与技术研究所Aktivität， Spezifität和Stabilität

Bei der Medikamentenentwicklung sind effiziente Strategien für ein metabolisches und toxikologisches Screening sowie die Produktion von neuen Ausgangsverbindungen und Arzneistoffderivaten für vor-klinische und klinische Studien im Grammmaßstab von hoher Wichtigkeit. Um die Rolle von verschiedenen Säugetier-Cytochrom P450 Enzymen (CYP450) bei der Arzneistoffderivatisierung zu untersuchen, werden häufig rekombinante Biokatalysesysteme angewendet. Aufgrund der komplexen Natur und Organisation dieser Klasse von Enzymen ist die Verwendung von Ganzzell-Biokatalysatoren von Vorteil, um Medikamentenderivatisierungsstudien durchzuführen und Arzneistoffe und deren Derivate zu produzieren. Allerdings kranken die derzeit verfügbaren Systeme vor allem an geringen Aktivitäten und Stabilitäten. Deshalb ist es wichtig, stabilere und effizientere mikrobielle Stämme für CYP450-katalysierte Biotransformationen zu entwickeln. Das primäre Ziel dieses Forschungsprojektes ist es daher, die Faktoren, die die katalytische Effizienz von CYP450-Enzymen in rekombinanten Mikroorganismen limitieren, zu finden und zu untersuchen. Auf der Basis des so generierten Wissens soll die Optimierung von mikrobiellen Ganzzellsystemen hin zu kontrollierbaren und effektiven Biokatalysatoren angegangen werden. Das Fernziel ist die Entwicklung von Katalysatoren zur Produktion von Arzneistoffen und ihren Derivaten im Grammmaßstab sowie zur Untersuchung der Wirkstoffderivatisierung durch CYP450-Enzyme aus der menschlichen Leber.Die Charakterisierung von rekombinanten Ganzzellbiokatalysatoren bedingt dabei eine sensitive und selektive Methode zur Identifizierung und Quantifizierung der eingesetzten Säugetier-CYP450-Enzyme. Aufgrund signifikanter Limitationen insbesondere bezüglich Sensitivität und Selektivität sind die heute bestehenden Methoden dafür nicht geeignet Die Anwendung zuverlässiger und hoch sensitiver sowie selektiver Massenspektrometrie (MS)-basierter Strategien stellt diesbezüglich eine vielversprechende Alternative dar. In diesem Gemeinschaftsprojekt soll eine solche Methodik für die Charakterisierung von Ganzzellbiokatalysatoren adaptiert und eingesetzt werden. Konkret wird dabei eine MS-basierte Identifizierung und absolute Quantifizierung von Säugetier-CYP450-Enzymen direkt mit der Optimierung von rekombinanten mikrobiellen Stämmen zur CYP450-Expression und -Katalyse gekoppelt. Dieser Ansatz wird Verbesserungen bezüglich Aktivität, Spezifität und Stabilität sowie Wirtsselektion und Reaktionsbedingungen erlauben.