Funktionelle Charakterisierung der Interaktion zwischen dem Multidrug Resistenz 1 Protein und Caveolin 1 und deren Bedeutung für die Radioprotektion von Normalgewebszellen

多药耐药1（MDR 1）基因通过外排泵功能产生并不只是因为化疗而产生，它也可以通过电离辐射诱导凋亡而产生。细胞膜局部窖蛋白1（CAV 1）的作用与正常细胞对窖蛋白和膜的培养及肿瘤抑制有关。Allerdings ist die Expression häufig in fortgeschrittenen Tumoren erhöht，and CAV 1 kann dort als Resistenzfaktor gegenüber ionisierender Strahlung plugken.许多患者在此接受了MDR 1和CAV 1的交叉试验。因此，在肿瘤中，基因经常被表达出来。MDR 1的转运功能取决于CAV 1的磷酸化调节。在本研究中，我们使用人源性淋巴母细胞TK 6-Zelllinie，将MDR 1与CAV 1结合，并建立了一个体外模型系统，使慢病毒转化为MDR 1或CAV 1。但我们知道，MDR 1的超表达导致了细胞凋亡，并导致了一种更好的克隆。CAV 1的超表达导致了细胞的凋亡，这是一种增殖的结果，但克隆基因并不存在。我们用慢病毒shRNA-Vektor抑制CAV 1特异性功能，使其特异性敲除CAV 1克隆并进行验证。本研究旨在探讨MDR 1和CAV 1在放射抵抗中相互作用的机制，以及MDR 1和CAV 1对细胞凋亡的抑制作用：MDR 1对CAV 1抗辐射作用的调节及其与CAV 1磷酸化的关系（CAV 1 Y14 F）用于MDR 1和功能性设计的相互作用-在Zellmembran/Organellmembrane中对MDR 1和CAV 1的定位

Das Multidrug Resistenz 1 (MDR1) Gen schützt durch seine Efflux-Pumpenfunktion nicht nur gegenüber verschiedenen Chemotherapeutika, sondern vermittelt auch Schutz gegenüber durch ionisierende Strahlung induzierte Apoptose. Das ebenfalls in der Zellmembran lokalisierte Caveolin 1 (CAV1) ist dort an der Bildung von Cavolae und Membranvesikeln beteiligt und gilt in Normalzellen als Tumorsuppressor. Allerdings ist die Expression häufig in fortgeschrittenen Tumoren erhöht, und CAV1 kann dort als Resistenzfaktor gegenüber ionisierender Strahlung wirken. Mehrere Studien weisen auf eine enge Verbindung zwischen MDR1 und CAV1 hin. So sind beide Gene oft gleichzeitig in Tumorzellen gegenüber den entsprechenden Normalgewebszellen verstärkt exprimiert. Außerdem wird die Transportfunktion von MDR1 über die Phosphorylierung von CAV1 reguliert. In eigenen Vorarbeiten haben wir die humane lymphoblastoide TK6-Zelllinie, die endogen weder MDR1 noch CAV1 exprimiert, als ein In-vitro-Modellsystem verwendet, das nach lentiviraler Transduktion entweder MDR1 oder CAV1 stabil exprimiert. Damit konnten wir zeigen, dass Überexpression von MDR1 die strahleninduzierte Apoptose unterdrückt und zu einem verbesserten klonogenen Überleben führt. Die Überexpression von CAV1 unterdrückt dagegen die frühe strahleninduzierte Apoptose, was in einer verstärkten Proliferation resultiert, aber das klonogene Überleben nicht steigert. Als Kontrolle für die CAV1-spezifische Funktion haben wir einen lentiviralen shRNA-Vektor für den spezifischen Knockdown von CAV1 kloniert und erfolgreich validiert. Ziele des Projektes sind• Untersuchung der Mechanismen der Interaktion zwischen MDR1 und CAV1 bei der Radioresistenz• Funktionelle Untersuchungen zur Inhibition der Apoptose durch MDR1 und CAV1: Bedeutung vonMDR1 für die radioresistente Wirkung von CAV1 sowie die Regulierung der antiapoptotischenFunktion von MDR1 durch CAV1• Ermittlung der Relevanz der Phosphorylierung von CAV1 (CAV1Y14F) für die Interaktion mit MDR1und dessen Funktionalität• Studien zur (Ko)-Lokalisierung von MDR1 und CAV1 in der Zellmembran/in Organellmembranen