Nahfeldspektroskopische Untersuchungen an einzelnen Membranproteinen in ihrer natürlichen Umgebung

在此基础上，研究人员提出了一种新的研究方法，即在研究过程中发现膜蛋白和膜蛋白，并在研究过程中发现膜蛋白和膜蛋白的关系。1 .在zellulären膜中研究膜蛋白，在10-20nm膜蛋白，在zellulären膜中研究膜蛋白können。Im Gegensatz zur herkömmlichen Aperturnahfeldmikroskopie erreichen aperturlose Sonden diesen Bereich。derhier gewählte andatz basiert dabei auder Verwendung von spitz zulaufenden, beleuchteten Metallsonden, die durch eine groß ße Verstärkung des elektrischen Feldes and derdersten Spitze Der Sonde stak lokalisierte Anregungsquelle bereitstellen。死Realisierung der angestrebten Messungen是eng verknupft麻省理工学院der Weiterentwicklung der Sonden嗯一张Sensitivitat祖茂堂erreichen,麻省理工学院der es moglich将,das信号einzelner Proteinmolekule detektieren祖茂堂能帮。in weiterer Schwerpunkt des Projektes liight in der durchfhrung von Messungen in flfl<s:1> sigkeiten durch die einfhrung eaftabstandskontrol， die and den herkömmlichen在der Rasterkraftmikroskopie angelehnt ist的敲开模式。研究了一种新型的<s:1>细菌敏感基因在fligigkeiten中的应用。Durch die Verwendung von scharfen Metallspitzen als Nahfeldsonde bietet sich ach die Möglichkeit gleichzeitig zu den optischen Information sach die topographic mit hoher Auflösung aufzeichnen zu können。in focus der geplanten nahfeldspektroskopischen Untersuchungen stehen zwei verschieden膜蛋白，das AE1-Protein in der浆膜von红细胞sowie as Zeiladhäsionsprotein E-Selektin， das die Adhäsion zwischen白细胞和内皮素vermitteln。Neben der bestimung der entsprechenden proteintelilung in den zellulären膜sollen auch funcktionelle Aspekte， die beispielsweise mit Konformationsänderungen de Proteins in verindung steen, betrachtet werden。

Das hier beantragte Forschungsprojekt zielt auf die Realisierung von nahfeldoptischen Untersuchungen mit hoher räumlicher Auflösung zur Identifizierung einzelner Membranproteine und ihrer funktionellen Charakterisierung in ihrer natürlichen Umgebung unter physiologisch relevanten Bedingungen. Aufgrund der sehr hohen Dichte vieler Proteine in zellulären Membranen, muss eine optische Auflösung im Bereich von 10-20nm bereitgestellt werden, um einzelne Membranproteine abbilden zu können. Im Gegensatz zur herkömmlichen Aperturnahfeldmikroskopie erreichen aperturlose Sonden diesen Bereich. Der hier gewählte Ansatz basiert dabei auf der Verwendung von spitz zulaufenden, beleuchteten Metallsonden, die durch eine große Verstärkung des elektrischen Feldes an der vordersten Spitze der Sonde eine stark lokalisierte Anregungsquelle bereitstellen. Die Realisierung der angestrebten Messungen ist eng verknüpft mit der Weiterentwicklung der Sonden, um eine Sensitivität zu erreichen, mit der es möglich wird, das Signal einzelner Proteinmoleküle detektieren zu können. Ein weiterer Schwerpunkt des Projektes liegt in der Durchführung von Messungen in Flüssigkeiten durch die Einführung einer Kraftabstandskontrolle, die an den herkömmlichen Tapping-Mode in der Rasterkraftmikroskopie angelehnt ist. Dieser Ansatz eignet sich speziell für kraftsensitive Messungen in Flüssigkeiten. Durch die Verwendung von scharfen Metallspitzen als Nahfeldsonde bietet sich auch die Möglichkeit gleichzeitig zu den optischen Information auch die Topographie mit hoher Auflösung aufzeichnen zu können. Im Fokus der geplanten nahfeldspektroskopischen Untersuchungen stehen zwei verschieden Membranproteine, das AE1-Protein in der Plasmamembran von Erytrocyten sowie das Zeiladhäsionsprotein E-Selektin, das die Adhäsion zwischen Leukocyten und Endothelzellen vermitteln. Neben der Bestimmung der entsprechenden Proteinverteilung in den zellulären Membranen sollen auch funktionelle Aspekte, die beispielsweise mit Konformationsänderungen des Proteins in Verbindung stehen, betrachtet werden.