Biosynthese des Phytochrom-Chromophors in Pflanzen und Cyanobakterien (C 08)
Biosynthese des Phytochrom-Chromophors in Pflanzen und Cyanobakterien (C 08)
批准号:
37128922
负责人:
金额:
$0.0万
依托单位:
依托单位国家:
德国
项目类别:
Collaborative Research Centres
财政年份:
2007
资助国家:
德国
项目状态:
已结题
起止时间:
2006-12-31 至 2008-12-31
中文摘要
植物胆红素的线条是四色的,它们是光合作用中的植物色素和光敏色素。拟南芥的光敏变色体植物色素动员蛋白(PΦB)和蓝藻中的藻红胆素是主要的生物合成物质。这些生物合成von PΦB起源于Spaltung des Hämringes Dedch eine Hämoxygenase。Interessanterweise beitzt das A.thaliana genom vier verschiedene gene,die für Potelle Hämoxygenasen kodieren.Lediglich für die Hämoxygenase HY1(HO-1)可用于生物化学研究。在大肠杆菌外显子中发现了潜在的KLoniert vor和Sollen重组基因。MIT Hilfe der rekombinanten soll eine Ensprechende katalytische Aktivität nachgewiesen.大北Sollen hauptsächlich katalytische Unterschiede der verschiedenen(Potellen)Hämoxygenasen herosgearbeitet.MIT Hilfe von Komplementments研究了植物色素-生色体的生物合成顺序和Eisenb.EisenLimit Untered.Der zweite teil des Projektes Dh MIT DEM Darauf Folgenden Enzym der Phytochromobilin BiSynthes,der Ferredosin-ABHängien Blin Reduktase Ph tochromobilin Synthase。Zur Bstimung von Katalysekonstante,SubstratSpezifität and Cofaktor-ABHänGigkeit soll rekombinantes Enzym生化法。Weiterhin Sollen vergleichend die beiden Bilinreduktasen PEBA and Pebb Aus Synehorics sp.这是不可能的。他说:“这是一种物质基础,是一种特殊的物质基础,是一种特殊的物质。发表了一篇文章,指出这是一种新的形式,也不同于传统的方法。在Einem weiteren Anatz soll anschlieüend der KatalySemachismus der Zwei-Elektroneneübertragenden Reduktasen aufgekläRT and MIT Hilfe der ESR-Spektroskopie die Bildung eines SubstratRadikals der Katalyse Bestätigt den.让我们一起努力吧,让我们一起来看看L的作品吧。
英文摘要
Phytobiline sind lineare Tetrapyrrole, die eine wichtige Rolle als prosthetische Gruppen des pflanzlichen Photorezeptors Phytochrom und der Lichtsammelpigmente in der cyanobakteriellen Photosynthese spielen. Das vorliegende Projekt befasst sich mit der Biosynthese des Phytochrom- Chromophors Phytochromobilin (PΦB) in Arabidopsis thaliana sowie dem verwandten Pigment Phycoerythrobilin in Cyanobakterien. Die Biosynthese von PΦB beginnt mit der Spaltung des Hämringes durch eine Hämoxygenase. Interessanterweise besitzt das A. thaliana Genom vier verschiedene Gene, die für potentielle Hämoxygenasen kodieren. Lediglich für die Hämoxygenase HY1 (HO-1) wurde bislang biochemisch eine Aktivität bestimmt. Die Gene der anderen potentiellen Hämoxygenasen liegen bereits kloniert vor und sollen rekombinant in Escherichia coli exprimiert werden. Mit Hilfe der rekombinanten Enzyme soll eine entsprechende katalytische Aktivität nachgewiesen werden. Dabei sollen hauptsächlich katalytische Unterschiede der verschiedenen (potentiellen) Hämoxygenasen herausgearbeitet werden. Mit Hilfe von Komplementationsstudien soll die Rolle der einzelnen Hämoxygenasen für die Phytochrom-Chromophor Biosynthese oder andere Prozesse, wie z.B. Eisenlimitation untersucht werden. Der zweite Teil des Projektes befasst sich mit dem darauf folgenden Enzym der Phytochromobilin Biosynthese, der Ferredoxin-abhängigen Bilin Reduktase Phytochromobilin Synthase. Zur Bestimmung von Katalysekonstante, Substratspezifität und Cofaktor-Abhängigkeit soll rekombinantes Enzym biochemisch untersucht werden. Weiterhin sollen vergleichend die beiden Bilinreduktasen PebA und PebB aus Synechococcus sp. untersucht werden. Hierbei ist die Substraterkennung von besonderer Bedeutung, da die Reduktasen HY2 und PebB eine identische Reaktion katalysieren, aber verschiedene Substrate voneinander unterscheiden. Aus diesem Grund soll die kürzlich publizierte Kristallstruktur der PcyA Reduktase herangezogen werden, um durch gezielte, ortsgerichtete Mutationen die an der Substraterkennung beteiligten Aminosäurereste zu identifizieren. In einem weiteren Ansatz soll anschließend der Katalysemechanismus der Zwei- Elektronene übertragenden Reduktasen aufgeklärt und mit Hilfe der ESR- Spektroskopie die Bildung eines Substratradikals während der Katalyse bestätigt werden. Letztendlich hoffen wir, die Struktur von mindestens einer weiteren Bilin Reduktase mit Hilfe der Röntgenstrukturanalyse zu lösen.
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