Charakterisierung neuer Uhrengene im circadianen Modellsystem Neurospora

分子机理研究，内源性生物动力学研究，生物动力学研究，生物动力学研究。Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden“Uhrengene”charakterisiert, die eine negative r<s:1>转录与蛋白生产。新实验研究，新技术，新技术，新技术，新技术，新技术，新技术，新技术。Weitere Komponenten m<e:1> ssen还鉴定了ifiziert werden， um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können。Der vorliegende Antrag stelline Initiative dar， bem klassischen节律模型系统Neurospora assassen molecular genetic schen策略与方法sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten Der inner schen Uhr ßerhalb des beskleebenen molecular回馈识别。Eine Library von Knockout- und Überexpressions-Mutanten (insertional mutagenesis), wind in spezifischen temperature - und Lichtzyklen auf circadiane Abweichungen hin <s:2> berpr<e:1> ft， and die相关基因durch质粒抢救鉴定。Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin <s:2> berpr<e:1> ft（周期、同步、温度补偿等）。unserere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze。(1)逆向遗传学，即随机诱变。德国“低风险高收益”Ansatz投资于德国东部的verversuchen，增长潜力巨大。(2) Forward Genetics bei geeigneten candidate bekannter, am Metabolismus bekannter Gene, sowie (3) bei Genen, von denen circaddiane Wirkungen bereits bekannt sind, die bisher jedoch ich verfolgt wurden。

Die Beschreibung der molekularen Mechanismen, die der endogenen Tagesrhythmik zugrunde liegen, erzielte im vergangenen Jahrzehnt große Fortschritte. Von Cyanobakterien bis zum Menschen wurden "Uhrengene" charakterisiert, die eine negative Rückkopplung zwischen Transkription und Proteinprodukten bilden. Neuere Experimente zeigen jedoch, dass zahlreiche Aspekte des circadianen Systems auch ohne diesen molekularen Feedback intakt bleiben. Weitere Komponenten müssen also identifiziert werden, um die zellulären Mechanismen der biologischen Tagesuhr umfassend verstehen zu können. Der vorliegende Antrag stellt eine Initiative dar, beim klassischen circadianen Modellsystem Neurospora crassa mit neuen molekulargenetischen Strategien und Methoden sowie mit neuen Screenig-Ansätzen die genetischen Komponenten der inneren Uhr außerhalb des beschriebenen molekularen Feedbacks zu identifizieren. Eine Library von Knockout- und Überexpressions-Mutanten (insertional mutagenesis), wird in spezifischen Temperatur- und Lichtzyklen auf circadiane Abweichungen hin überprüft, und die relevanten Gene durch plasmid rescue identifiziert. Die so gewonnenen Uhren-Mutanten werden auf alle circadianen Qualitäten hin überprüft (Periode, Synchronisation, Temperaturkompensation, etc.). Unsere Vorgehensweise beinhaltet drei Ansätze. (1) Reverse Genetics durch random mutagenesis. Dieser "low risk & high gain" Ansatz hat bereits in ersten Vorversuchen sein großes Potential gezeigt. (2) Forward Genetics bei geeigneten Kandidaten bekannter, am Metabolismus beteiligter Gene, sowie (3) bei Genen, von denen circadiane Wirkungen bereits bekannt sind, die bisher jedoch nicht weiter verfolgt wurden.