Determining the Domain Linkages in the Myosin Motor

肌肉收缩是通过肌凝蛋白交叉桥和动作丝之间的周期性相互作用产生的。这个循环是由ATP水解驱动的。肌凝蛋白桥有两个重要的功能：结合和释放肌动蛋白丝，并执行“动力冲程”，推动肌动蛋白丝通过锚定的桥。动力冲程是通过长杠杆臂从“前动力冲程”到“后动力冲程”配置的旋转来完成的。两种形式的肌凝蛋白过桥前和后权力中风已经广泛表征的蛋白质晶体学。与肌动蛋白的结合可以是“弱”或“强”，这是由ATP结合控制的。最近在我们实验室进行的高分辨率低温电镜研究已经建立了一个弱-强转变的模型，并了解了ATP结合和肌动蛋白结合的机制。这是由于关闭了十字桥上的“深裂缝”而引起的。然而，到目前为止，只发现了裂开形式。我们现在希望确定导致裂隙闭合交叉桥的点突变体，并通过x射线晶体学和电子显微镜来表征这些突变体。研究方向：肌球蛋白- querbrcke和Aktinfilament。三聚氰胺三磷酸腺苷水解酶。Die myosin - querbr<s:1> cke hat zwei, whichtige functiontionen: Anbindung and das und Lösung vom Aktinfilament sowie ausf<e:1> hrung des“Power Stroke”，der das Aktinfilament and der verankerten querbr<e:1> cke vorbeischiebt。模具旋转eines - langen Hebelarms von der “Vor-Power-Stroke”或“Nach-Power-Stroke” Stellung bewirkt diesen Power-Stroke。Beide Stellungen der myosin - querbrbrcke [j] [j] .蛋白质晶体图学（英文）；Je nach ATP-Bindung kann die Bindung和Aktin "schwach" oder "stark" sein。Auf grunserer j<s:1> ngsten hochauflösenden Cryo-EM-Untersuchungen haben wir eine model entwickelt zur Erklärung des Übergangs von "schwach" zu "stark" sowie frden Mechanismus, der die ATP-Bindung mit der Aktin-Bindung koppelt, indem sich nämlich die "Kluft" in der querbr<e:1> cke schließt。过敏症的发生与其他疾病的发生有关。在此基础上，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现，研究人员发现。

Muscle contraction comes about through a cyclical interaction between the myosin cross-bridge and the action filament. The cycle is driven by ATP hydrolysis. The myosin cross bridge has two important functions: to bind and release from the actin filament and to execute the "power stroke" which pushes the actin filament past the anchored cross bridge. The power stroke is accomplished by the rotation of a long lever arm from a "pre-power stroke" to a "post-power stroke" configuration. Both the pre-power stroke and post-power stroke forms of the myosin cross bridge have been extensively characterised by protein crystallography. The binding to actin can be "weak" or "strong", which is controlled by ATP binding. Recent high resolution cryo-em studies in our labatory have led to a model of the weak-strong transition and an understanding of the mechanism by which ATP binding and actin binding are linked. This arose through the closing of the "deep cleft" in the cross bridge. However, until now only the cleft-open form has been found. We now wish to identify point mutants leading to cleft-closed cross bridges and to characterise these by X-ray crystallography and electron microscopy. Zusammenfassung: Muskeln kontrahieren auf Grund der zyklischen Wechselwirkung zwischen der Myosin-Querbrücke und dem Aktinfilament. Der Zyklus wird durch ATP-Hydrolyse verursacht. Die Myosin-Querbrücke hat zwei wichtige Funktionen: Anbindung an das und Lösung vom Aktinfilament sowie Ausführung des "Power Stroke", der das Aktinfilament an der verankerten Querbrücke vorbeischiebt. Die Rotation eines langen Hebelarms von der "Vor-Power-Stroke" zur "Nach-Power-Stroke" Stellung bewirkt diesen Power-Stroke. Beide Stellungen der Myosin-Querbrücke sind mit Hilfe der ProteinKristallographie ausführlich charakterisiert worden. Je nach ATP-Bindung kann die Bindung an Aktin "schwach" oder "stark" sein. Auf Grund unserer jüngsten hochauflösenden Cryo-EM-Untersuchungen haben wir eine Modell entwickelt zur Erklärung des Übergangs von "schwach" zu "stark" sowie für den Mechanismus, der die ATP-Bindung mit der Aktin-Bindung koppelt, indem sich nämlich die "Kluft" in der Querbrücke schließt. Allerdings haben wir bisher nur die Form mit der "offenen Kluft" gefunden. Wir haben jetzt vor, Punktmutanten zu finden, die zu Querbrücken mit "geschlossener Kluft" führen und diese dann mit Hilfe von Röntgenkristallographie und Elektronenmikroskopie zu charakterisieren.