Strukturveränderungen an Proteinen während Vernebelungs- und Trocknungsprozessen

[3] [2] [2] [1] [2] [2] [1] [2]干扰素的应用对蛋白质细胞聚集和颗粒失活的影响。Die Ursachen dieser Veränderungen分子Ebene和jedoch noch unbekant。Mit beantragten project beabsictigen wir, möglichst qualitative Untersuchungen der Veränderungen in den Sekundär- und Tertiärstrukturen von modelproteinen während der Vernebelung and trockknung durchzuf<s:1> hren。Mehrere Proteine unterschiedlicher Grundstruktur sollen untersucht werden, die in unterschiedlichem Maße die wichtigsten Sekundärstrukturelemente, d.h. a-Helix, b-Faltblatt und Ungeordnet, darstellen。Veränderungen der Sekundärstruktur werden mittelels FT-IR和Zirkular二色定量许可。Veränderungen in der Faltung der protein werden mitels, Zirkular Dichroismus, fluorescence and die Anwendung eines neutigens dynamicchen Lichtstreuungsverfahrens ermittelt。蛋白质浓度与Massenverhältnis Vernebelungsluft/ spr<s:1> hfl<e:1> sigkeit的关系。Bei der spr<s:1> htrockung werden Veränderungen in Sekundär- und Tertiärstruktur in festen Pulvers sowie nach Wiederauflösung des Pulvers in flilsigen Medien ermittelt。河北省soll eine mögliche Reversibilität der Strukturveränderungen festgestellt werden。Die Vernebelung der Proteinlösungen in verfl<e:1> sigsystem Kältemittel and Die Vernebelung um festzustellen, ob vernebelungsiduzierte Veränderungen and den Proteinen duren das infrieren rückgängig gemacht werden。Strukturveränderungen and den Proteinen, die während des Gesamtprozesses der spr<s:1> hgefrertrockung autreten， werden ebenfalls定量许可。In diesen experimentsololein mögliches Gesamtbild des Verhaltens der protein mit interschiedlichen Sekundärstrukturelementen分子Ebene während Vernebelungs- and trockknunsprozessen aufgestellt werden können。

Bisherige Untersuchungen der Sprühtrocknung oder Sprühgefriertrocknung von Proteinen zur Herstellung von Pulvern zur pulmonaren bzw. parenteralen Applikation haben Aggregation und partielle Inaktivierung der Proteine festgestellt. Die Ursachen dieser Veränderungen auf molekularer Ebene sind jedoch noch unbekannt. Mit dem beantragten Projekt beabsichtigen wir, möglichst qualitative Untersuchungen der Veränderungen in den Sekundär- und Tertiärstrukturen von Modellproteinen während der Vernebelung und Trocknung durchzuführen. Mehrere Proteine unterschiedlicher Grundstruktur sollen untersucht werden, die in unterschiedlichem Maße die wichtigsten Sekundärstrukturelemente, d.h. a-Helix, b-Faltblatt und Ungeordnet, darstellen. Veränderungen der Sekundärstruktur werden mittels FT-IR und Zirkular Dichroismus quantitativ ermittelt. Veränderungen in der Faltung der Proteine werden mittels Zirkular Dichroismus, Fluorimetrie und die Anwendung eines neuartigen dynamischen Lichtstreuungsverfahrens ermittelt. Bei der Vernebelung wässriger Lösungen der Proteine in Luft werden Proteinkonzentration und Massenverhältnis Vernebelungsluft/Sprühflüssigkeit in einer Düse variiert. Bei der Sprühtrocknung werden Veränderungen in Sekundär- und Tertiärstruktur im festen Pulver sowie nach Wiederauflösung des Pulvers in flüssigen Medien ermittelt. Hierbei soll eine mögliche Reversibilität der Strukturveränderungen festgestellt werden. Die Vernebelung der Proteinlösungen in verflüssigtem Kältemittel wird auch untersucht um festzustellen, ob vernebelungsiduzierte Veränderungen an den Proteinen durch das Einfrieren rückgängig gemacht werden. Strukturveränderungen an den Proteinen, die während des Gesamtprozesses der Sprühgefriertrocknung auftreten, werden ebenfalls quantitativ ermittelt. In diesen Experimenten soll ein mögliches Gesamtbild des Verhaltens der Proteine mit unterschiedlichen Sekundärstrukturelementen auf molekularer Ebene während Vernebelungs- und Trocknungsprozessen aufgestellt werden können.