Single-molecule functional analysis of the yeast ABC-transporter Pdr5p

ABC转运蛋白Pdr 5 p来自S.酿酒酵母是Hefe的一种耐多硝基酚（PDR）的Schlüsselelement。PDR是人类多氢耐药的现象学和功能学。Als fundamentale Voraussetzung für unseren Antrag，ist uns gelungen，Pdr5p in funktionaler Form aufzureinigen.这是一种天然的、可溶解的洗涤剂，它可以将脂质体蛋白质添加到一种特殊的不动微胶囊中。在多参数荧光检测（MFD）中，一个荧光标记ATP分子和/或一个荧光标记底物分子，因此，随机分析方法韦尔登用于拉格分析，分子机制，以及ATP水解与底物转运的相互作用。这一结果韦尔登一张详细的分子图像显示出来，在拉格层中，ABCTransporter与MDR 1（P-gp）或Pdr 5 p一样，一种不同的结构不需要底物特异性来识别，也不需要通过ATP-生物膜来转运。

Der ABC-Transporter Pdr5p aus S. cerevisiae ist ein Schlüsselelement der Pleitrophen Drogenresistenz (PDR) in Hefe. PDR ist phenomenologisch und funktional eng mit der Multidrogenresistenz (MDR) in Menschen verwandt. Als fundamentale Voraussetzung für unseren Antrag, ist uns gelungen, Pdr5p in funktionaler Form aufzureinigen. Es ist geplant, zuerst Detergenz-solubilisiertes sowie Liposomen-rekonstituiertes Protein auf der Oberfläche eines Mikroskopdeckglases spezifisch zu immobilisieren. Unter Verwendung der Multiparameter-Fluoreszenz-Detektion (MFD) einzelner fluoreszierender ATP-Moleküle und/oder fluoreszierender Substratmoleküle, sowie die Anwendung stochastischer Analysemethoden werden wir in der Lage sein, die molekularen Mechanismen, welche die ATP-Hydrolyse mit dem Substrattransport koppeln, aufzulösen. Diese Ergebnisse werden ein detailiertes Bild über die molekularen Schritte liefern, mit denen ABCTransporter wie MDR1 (P-gp) oder Pdr5p in der Lage sind, eine Vielzahl strukturell nicht verwandter Substrate spezifisch zu erkennen und unter ATP-Verbrauch über biologische Membranen zu transportieren.