Einfluss einer Probiotika-Fütterung auf das Expressions-Profil porciner Darm-Epithelzellen in vivo

本文介绍了一种利用具有韦尔登菌NCIMB 10415特性的益生菌对细菌进行体外培养的方法。通过对蛋白质表达量的调节（包括Wachstumsfaktoren、Hormonrezeptoren、Extrazelluläre Matrix-Komponenten、Streptococcus- und Oxidationsschutz-Proteine、Membran-Transporter）的研究，我们首先要了解韦尔登的微生物生长情况。RNA分析技术的定性和定量方法使表达标记物的检测成为一种韦尔登，从而实现局部调控。Ein weiterer Aspekt ist die Suche nach neuen Transkripten，die in Probiotika-gefütterten Schweinen reguliert erscheinen.死亡是通过对实验动物和对照组实验动物的心肌细胞进行cDNA-Klonierung分析而获得的。随后，一个初步的猪跨膜蛋白数据库建立在一个微阵列系统上，用于复杂的韦尔登表达分型，从而使一种方法筛选来自Darmepithelzellen的跨膜蛋白。微阵列技术可以对早期的病原体进行筛选，也可以对病原体进行韦尔登，从而影响病原体对上皮细胞和免疫细胞的影响。

Mittels molekularer Transkript-Analysen sollen spezifische Reaktionen der Darm-Epithelzellen und der Lymphozyten bei Ferkeln nach Applikation des Probiotikums Enterococcus faecium NCIMB 10415 charakterisiert werden. Durch die Untersuchung möglicher Modulationen des Expressions-Musters ausgewählter Proteine (Kandidatengene: Wachstumsfaktoren, Hormonrezeptoren, Extrazelluläre Matrix-Komponenten, Streß- und Oxidationsschutz-Proteine, Membran-Transporter) sollen erste Aussagen über die intestinale Wirkung des verwendeten Probiotiums ermöglicht werden. Mittels qualitativer und quantitativer RNA-Analyse-Techniken können so spezifische Expressionsmarker festgestellt werden, die eine lokale Regulation erfahren. Ein weiterer Aspekt ist die Suche nach neuen Transkripten, die in Probiotika-gefütterten Schweinen reguliert erscheinen. Dies wird durch substraktive cDNA-Klonierung von Darmepithel-Proben aus behandelten Tieren versus Proben aus der Kontrollgruppe erfolgen. Nach Erstellung einer ersten intestinalen porcinen Transkriptom-Datenbank soll ein Mikroarray-System zur komplexen Typisierung der Expression etabliert werden, um ein schnelles Screening der Transkripte aus Darmepithelzellen zu ermöglichen. Der Mikro-Array soll als schnelles Screeningverfahren innerhalb des ersten Versuches (Probiotika-Fütterung versus Kontrollgruppe) als auch beim Challenge-Versuch eingesetzt werden, um den Einfluß des Probiotikums auf Epithelzellen und bei der Immunantwort auf Keime zu untersuchen.