Funktionelle Charakterisierung post-translationaler Modifikationen des SMN/PRMT5-Komplexes und Identifizierung der modifizierenden Enzyme

通过体外实验观察核糖核蛋白-类核糖体片段（U snRNP）在体内的作用，发现其是通过一种蛋白质合成的复杂网络来实现的。这些蛋白质是由两种不同的有机物组成的，即SMN-和PRMT 5-复合物。我们知道，通过磷酸化翻译后修饰韦尔登，可以使运动神经元-Erkrankung SMA的关键产物SMN的复杂性更大。本项目解决了磷酸化氨基的蛋白质质谱鉴定和与韦尔登核酸相关的生理学问题。酶的识别和功能特性将被更好地修饰，这将是一种更好的工作方式。Schließlich将在Zebrafischsystem中进行测试，以获得修饰酶对snRNP生物合成和Folge的影响，从而导致运动神经元变性。我们将通过这些工作来研究SMN/PRMT 5复合体的调控和SMA的致病机制。

Obwohl sich die Ribonukleoprotein-Partikel des Spleißosoms (U snRNPs) in vitro aus den Einzelkomponenten spontan zu funktionsfähigen Gebilden zusammenlagern können, ist dieser Prozess in vivo durch ein kompliziertes Netzwerk von Proteinfaktoren gesteuert. Diese Proteine sind in zwei miteinander kooperierenden Einheiten, den SMN- und PRMT5-Komplexen, organisiert. Wir konnten vor kurzem nachweisen, dass mehrere Komponenten dieser Komplexe, einschließlich SMN, dem Krankheitsgenprodukt der Motorneuron-Erkrankung SMA, durch Phosphorylierung post-translational modifiziert werden. Im beantragten Projekt sollen die phosphorylierten Aminosäuren dieser Proteine massenspektrometrisch identifiziert und deren physiologische Relevanz bei der Zusammenlagerung der U snRNPs untersucht werden. Die Identifizierung und funktionelle Charakterisierung der daran beteiligten modifizierenden Enzyme wird ein weiterer Schwerpunkt unserer Arbeiten sein. Schließlich wollen wir im Zebrafischsystem testen, ob die Inaktivierung der modifizierenden Enzyme zu einer verminderten U snRNP-Biosynthese und, als Folge, zur Motorneuron-Degeneration führt. Wir erhoffen uns durch diese Arbeiten wichtige Einblicke in die Regulation des SMN/PRMT5- Komplexes und die Pathogenese der SMA.