B cell repertoires and function in food allergen multi-OIT

项目摘要 食物过敏在美国越来越普遍，大约三分之一的患者 对多种食物的反应。及时有效地治疗多种食物过敏的临床需求尚未得到满足。 的方式，但应指导选择最佳治疗策略的机制因素尚不清楚。 本项目旨在获得对人类B细胞和免疫球蛋白（IG）的新认识 对多种食物过敏的患者的反应，并分析多种过敏原诱导的B细胞改变 口服免疫疗法（多药OIT）单独或与靶向IgE或IL-14/IL-13受体的生物制剂联合 组分IL-14R α。我们将使用流式细胞术分离过敏原特异性B细胞，重点是细胞特异性 针对牛奶、花生或腰果过敏原，与免疫球蛋白（IG）基因的DNA深度测序配对 重排，以表征过敏患者中的致病性B细胞群，并确定 诱导克隆群体、抗体同种型表达、抗体体细胞突变和亲和力的变化 在这些B细胞群体中，在成功的多细胞OIT治疗期间。我们将评估是否有B细胞 在多阶段OIT之前或多阶段OIT期间，可以预测参与者的反应， 用于指导治疗。这些研究将在具有良好生物学特性的多种过敏性 参与项目1中提出的试点、2期多中心OIT临床试验的受试者，以及来自适当的 特应性和健康对照受试者。我们将评估和比较B细胞的分子特征， 牛奶、花生和腰果过敏原特异性抗体，以及它们对多种过敏原的反应， 同样的人在一部分参与者中，我们将研究血液和胃肠道活检标本中的B细胞， 确定外周血B细胞监测在多大程度上准确地反映了过敏性疾病的状态， 患者的胃肠道，以及多种抗生素引起的变化。重要的是，我们还将分析 在多次OIT期间靶向IgE或IL-14R α的单克隆抗体治疗，以确定这些治疗在多大程度上 生物疗法影响由多药OIT诱导的B细胞变化的性质和时间进程。我们还将 在POISED和MAPX OIT试验中对参与者的B细胞进行长期随访研究。 本项目的B细胞数据将与临床数据和实验数据一起进行合并和分析。 来自项目1、3和4以及核心B的T细胞和嗜碱性粒细胞的数据，与数据分析合作 核心C，能够全面评估与多种食物相关的免疫表型 过敏性疾病，并具有成功和持久的治疗反应，以多种抗肿瘤药物。

PROJECT SUMMARY     Food allergy is increasingly prevalent in the United States, and approximately one-­third of patients have  reactivity to multiple foods. There is an unmet clinical need to treat multi-­food allergy in a timely and efficacious  manner, but the mechanistic factors that should guide selection of an optimal treatment strategy are unclear.  This project aims to obtain fundamental new understanding of human B cell and immunoglobulin (Ig)  responses in patients allergic to multiple foods, and to analyze the B cell alterations induced by multi-­allergen  oral immunotherapy (multi-­OIT) alone or in combination with biologics targeting IgE or the IL-­4/IL-­13 receptor  component IL-­4Rα. We will use flow cytometry isolation of allergen-­specific B cells, focusing on cells specific  for milk, peanut or cashew allergens, paired with DNA deep sequencing of immunoglobulin (Ig) gene  rearrangements, to characterize pathogenic B cell populations in allergic patients, and to determine what  changes in clonal populations, antibody isotype expression, antibody somatic mutation, and affinity are induced  in these B cell populations during successful multi-­OIT treatment. We will evaluate whether there are B cell  repertoire features, either prior to multi-­OIT, or during multi-­OIT, that predict participants’ responses and could  be used to guide therapy. The studies will be performed on specimens from well-­characterized multi-­allergic  participants in the pilot, phase 2 multi-­OIT clinical trial proposed in Project 1, as well as from appropriate  atopic and healthy control subjects. We will evaluate and compare the molecular features of B cells and  antibodies specific for milk, peanut and cashew allergens, and their alterations in response to multi-­OIT, within  the same people. In a subset of participants, we will study B cells in both blood and GI biopsy specimens, to  determine to what extent peripheral blood B cell monitoring accurately reflects the allergic disease state in the  GI tract of patients, and the changes induced by multi-­OIT. Importantly, we will also analyze the effects of  monoclonal antibody therapies targeting IgE or IL-­4Rα during multi-­OIT, to determine the extent to which these  biologic therapies affect the nature and time course of B cell changes induced by multi-­OIT. We will additionally  perform long-­term follow up studies of B cells in participants in our POISED and MAPX OIT trials.     The B cell data from this Project will be combined and analyzed together with clinical data and experimental  data from T cells and basophils from Projects 1, 3 and 4, and Core B, in collaboration with the Data Analysis  Core C, to enable a comprehensive evaluation of immunological phenotypes associated with multi-­food  allergic disease, and with successful and durable therapeutic responses to multi-­OIT.