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Recherche d'enzymes thermophiles d'intérêt industriel par une approche métagénomique

Recherche d'enzymes thermophiles d'intérêt industriel par une approche métagénomique
国际工业嗜热酶研究
批准号:
321851-2005
负责人:
Juteau, Pierre
金额:
$4.7万
依托单位国家:
加拿大
项目类别:
Strategic Projects - Group
财政年份:
2007
资助国家:
加拿大
项目状态:
已结题
起止时间:
2007-01-01 至 2008-12-31

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
莱斯酶找到了用途,转移了行业,倒出了产品的替代品,激起了人们对L环境的厌恶。倒入Rester Compétitics et Aamélier Leur Products,Les Industries De Nouveles De Nouvelles酵素Plus Products,再加上Résistantes et avec un SPECTIVE d‘ACTIVITéPLUS Large。Comme ces酵素为微生物提供了一种新的方法,传统的分离方法不亚于L的分离,而是一种纯粹的微生物培养方法。首先,微生物存在的1%是纯培养的,99%的酶是自然界的。La Métagéonomique Permet de Controurner ce Prolème.这是一种方法,吹捧L的环保技术和克隆技术可在实验室种植。在《métagénothèque》一书中,竞争者de milliers de clones dans lesquels est réparti le matériel génétique de la microflore de L‘échantillon。在这一系列活动中,克隆人和克隆人S倒出了识别符ceux qui Contientent des gènes codant Pour des Case d‘Intérèt Induilt Industries.Le Pre发出了利用donc la Métagéonomique倾倒新型酶类型保护酶、脂肪酶和糖水解酶Démontrant、Entre autres、un bonne热稳定的项目。嗜热菌(55-70°C)和底物(Exit de viande、Huile、Chitine等)。从L的血清中提取出L的复合菌落,包括大肠杆菌、假单胞菌、链霉菌和芽孢杆菌。两种战略的机器人,因此,它的杂交Sur puce d‘ADN avec des Sondes Visant des gènes d’intérèt et par检测酶的帮助下,L‘帮助斑块96 puits和de底物荧光。S和S等人和他们一起克隆了S的儿子。LES酶的血清和发酵产物在工业条件下进行测试。
英文摘要
Les enzymes sont utilisées dans diverses industries pour remplacer des produits chimiques agressifs nuisibles à l'environnement. Pour rester compétitives et améliorer leurs produits, les industries doivent trouver de nouvelles enzymes plus efficaces, plus résistantes et avec un spectre d'activité plus large. Comme ces enzymes proviennent généralement de micro-organismes, leur découverte passe traditionnellement par l'isolation en culture pure de micro-organismes producteurs à partir d'échantillons environnementaux. Cependant, puisque seul 1% des micro-organismes existants peuvent ainsi être obtenus en laboratoire en culture pure, 99% des enzymes présents dans la nature échappent à cette méthode. La métagénomique permet de contourner ce problème. Dans cette approche, tout l'ADN d'un échantillon environnemental est extrait et cloné dans une bactérie cultivable en laboratoire. On forme donc une " métagénothèque " contenant des milliers de clones dans lesquels est réparti le matériel génétique de la microflore de l'échantillon. Ensuite, ces clones sont criblés pour identifier ceux qui contiennent des gènes codant pour des enzymes d'intérêt industriel.Le présent projet utilise donc la métagénomique pour trouver de nouvelles enzymes de type protéase, lipase et glycohydrolases démontrant, entre autres, une bonne thermostabilité. La microflore qui sert de source de gènes sera obtenue par un enrichissement en bioréacteurs aérobies thermophiles (55-70°C) recevant divers substrats d'intérêt (extrait de viande, huile, chitine, etc.). La métagénothèque sera formée par l'extraction de l'ADN d'un échantillon composite provenant des bioréacteurs et par le clonage de cet ADN dans un vecteur navette capable d'être utilisé par E. coli, Pseudomonas, Streptomyces et Bacillus. Deux stratégies de criblage robotisé seront utilisées, soit par hybridation sur puce d'ADN avec des sondes visant des gènes d'intérêt et par tests enzymatiques à l'aide de plaques de 96 puits et de substrats fluorogéniques. Les clones positifs seront caractérisés et séquences, et les plus intéressants seront clonés dans des vecteurs d'expression. Les enzymes seront ensuite produites en fermenteur et testées en conditions industrielles.
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