Free-labelled fluorescent method for ATP detection assisted by T4 DNA ligase
Free-labelled fluorescent method for ATP detection assisted by T4 DNA ligase
复制标题
T4 DNA 连接酶辅助的游离标记荧光法检测 ATP
DOI：
10.1039/c6ay03266d
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发表时间：
2017-02
影响因子：
3.1
通讯作者：
Zhao YC
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Huang Hongyun;Fu Shui;Huang Yan;Tian Jianniao;Zhao Yanchun;Zhao Shulin;Tian JN;Zhao YC
使用一种简单、高选择性的生物传感器进行ATP定量分析。在这里，我们引入两个发夹探针作为矩阵。当Exo III消化它们的双链体时，被阻断的G-四链体释放。然后N-甲基中卟啉IX（NMM）与G-四链体结合产生强荧光。但是当加入ATP时，它触发了T4 DNA连接酶将两个发夹连接起来。结果，Exo III不能水解发夹，导致低信号输出。该方法对ATP的检测限为3.75 nM，线性范围为5-300 nM。该方法具有良好的选择性和特异性，无需繁琐的处理和标记过程。
A facile, highly selective biosensor was used for ATP quantitative analysis. Here we introduce two hairpin probes as the matrix. While Exo III digested their duplexes, the blocked G-quadruplex released. Then N-methyl mesoporphyrin IX (NMM) integrated with G-quadruplex to produce strong fluorescence. But when ATP was added, it triggered the T4 DNA ligase to link the two hairpins. As a result, Exo III could not hydrolyze the hairpins leading to a low signal out. With this method, the detection limit reached 3.75 nM, and linear range 5–300 nM for ATP. This method has good selectivity and specificity without a tedious treatment and label process.
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