Liposome-mediated detection of SARS-CoV-2 RNA-positive extracellular vesicles in plasma.
Liposome-mediated detection of SARS-CoV-2 RNA-positive extracellular vesicles in plasma.
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DOI：
10.1038/s41565-021-00939-8
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发表时间：
2021-09
影响因子：
38.3
通讯作者：
Hu TY
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Ning B;Huang Z;Youngquist BM;Scott JW;Niu A;Bojanowski CM;Zwezdaryk KJ;Saba NS;Fan J;Yin XM;Cao J;Lyon CJ;Li CZ;Roy CJ;Hu TY
血浆 SARS-CoV-2 RNA 可能代表呼吸道 RNA 水平的一种可行的诊断替代方案，呼吸道 RNA 水平在感染后迅速下降。 RT-qPCR 参考检测在血浆中表现不佳，可能反映了释放到循环中的病毒 RNA 的稀释和降解，但这些问题可以通过分析包装到细胞外囊泡 (EV) 中的病毒 RNA 来解决。在此，我们描述了一种检测方法，其中直接从血浆捕获的 EV 与负载试剂的脂质体融合，以灵敏地扩增和检测 SARS-CoV-2 基因靶标。这种方法准确诊断了 COVID-19 患者，包括 RT-qPCR 漏掉的疑难病例。在非人类灵长类动物模型中，感染后第一天检测到 SARS-CoV-2 阳性 EV，并在第 6 天至第 28 天终点期间达到稳定水平，而在幼儿中观察到 20-60 天的信号持续时间。这种使用非传染性样本的纳米技术方法可以通过扩展病毒检测窗口来识别当前检测中遗漏的 COVID-19 病例，从而改善 COVID-19 的诊断。
Plasma SARS-CoV-2 RNA may represent a viable diagnostic alternative to respiratory RNA levels that rapidly decline after infection. RT-qPCR reference assays exhibit poor performance with plasma, likely reflecting dilution and degradation of viral RNA released into the circulation, but these issues could be addressed by analyzing viral RNA packaged into extracellular vesicles (EVs). Herein we describe an assay approach where EVs directly captured from plasma are fused with reagent-loaded liposomes to sensitively amplify and detect a SARS-CoV-2 gene target. This approach accurately diagnosed COVID-19 patients, including challenging cases missed by RT-qPCR. SARS-CoV-2-positive EVs were detected at day one post-infection, and plateaued from day six to the day 28 endpoint in a non-human primate model, while 20–60 day signal durations were observed in young children. This nanotechnology approach, which uses a non-infectious sample, could thus improve COVID-19 diagnosis by extending virus detection windows to identify COVID-19 cases missed by current assays.
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--
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通讯作者：
Longatti A