Untersuchungen zur Rolle der Nukleären DNA-Helikase II (RNA-Helikase A) in der DNA-Reparatur

核DNA解旋酶II(RNA解旋酶A)在DNA修复中的作用研究

基本信息

项目摘要

Die Nukleäre DNA-Helikase II (NDH II)/RNA-Helikase A (RHA) ist ein evolutionär hoch konserviertes Enzym, das man in Pflanzen, Würmern, Fliegen und beim Menschen findet. Dabei weisen die Helikasen aus Drosophila und Mensch eine 50%ige Identität ihrer ca. 1300 Aminosäuren auf. Die bisherigen Ergebnisse zur physiologischen Funktion der NDH II/RHA legen vor allem eine Beteiligung an der Transkription nahe. Die DNA-Entwindungsdaten sprechen aber auch für eine Mitwirkung der NDH II/RHA an der Replikation, der Reparatur und der Rekombination. Unsere eigenen Befunde zeigen eine Kolokalisation der NDH II mit dem Ku- Antigen und der DNA-abhängigen Proteinkinase DNA-PK, die beide in die Reparatur von DNADoppelstrangbrüchen involviert sind. Darüber hinaus wird NDH II von DNA-PK phosphoryliert. Ferner beobachten wir eine Kopurifikation und Kolokalisation mit der Werner-Helikase, wobei letztere kollabierte Replikationsgabeln auflösen hilft. Andere Gruppen fanden Kopurifizierungen von NDH II mit der DNA-Polymerase delta und PCNA (proliferating cell nuclear antigen) sowie mit dem Tumorsuppressorprotein BRCA1. All dies deutet darauf hin, dass NDH II/RHA über seine Funktion als Transkriptionsfaktor hinaus auch an weiteren Vorgängen des DNA-Metabolismus beteiligt ist. So haben wir haben Hinweise auf eine Beteiligung der NDH II/RHA an der Entwindung von DNA-RNA-Hybriden in angehaltenen Transkriptionsblasen. Biochemische und zellbiologische Untersuchungen zur Beteiligung der NDH II/RHA und der WRN-Helikase an der Entwindung von RNA- und DNA-haltigen D-Loop-Strukturen sind Gegenstand des vorliegenden Antrags.
DNA-螺旋酶II(NDH II)/RNA-螺旋酶A(RHA)是一种进化的高浓度酶,它是人们在Pflanzen、Würmern、Fliegen和beim Menschen发现的。Dabei weisen die Helikasen from Drosophila und Mensch eine 50% Identität ihrer ca. 1300 Aminosäuren auf. NDH II/RHA的生理功能的生物学效应是通过一个简单的移植来实现的。Die DNA-Entwindungsdaten sprechen aber auch aür eine Mitchellung der NDH II/RHA an der dekation,der Reparatur und der Rekombination.在涉及DNA损伤的修复过程中,通常使用Ku-抗原和DNA-结合蛋白激酶DNA-PK进行NDH II的克隆化。NDH Ⅱ是一种磷酸化的DNA激酶。我们将通过沃纳-赫利卡塞的合作来实现知识产权化和知识产权化,这是一个让知识产权保护更加有效的过程。另外,NDH II与DNA聚合酶δ和增殖细胞核抗原(PCNA)以及肿瘤抑制蛋白BRCA 1的结合也是NDH II的研究重点。所有这些都是因为NDH II/RHA的跨膜转运功能也是DNA代谢的重要组成部分。因此,我们已经对NDH II/RHA进行了研究,并对DNA-RNA-hybriden在抗肿瘤方面的作用进行了研究。NDH II/RHA和WRN-螺旋酶的生物化学和生物学研究以及RNA-和DNA-半环-D-Loop-结构的相互作用都是潜在的陷阱。

项目成果

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