In vitro und in vivo Charakterisierung der durch Topoisomerase I induzierten DNA-Reparatur

人类DNA-拓扑异构酶I（Topo I）是一种具有遗传毒性的酶，它能使人的DNA在应激条件下产生遗传毒性，并能使人的DNA在异分枝杆菌和异分枝杆菌中产生遗传毒性。Befindet siich der Schaden in unmittelbar Nähe zur Topo I- bindungsstelle, misslt der Ligationsversuch and Topo I bildet einen als“suizidal”bezeichneten kovalenten Komplex mit der geschädigten DNA。“Doppelschnitt”与“Doppelschnitt”、“Doppelschnitt”、“Doppelschnitt”、“Doppelschnitt”、“freigesetzt werden”的关系。[3] [ei] .浙江大学学报（自然科学版）。13 .基因重组研究进展。hierf<s:1> r wind ein komplementärer DNA-Einzelstrang benötigt， der和seinem 5'-Ende eine free hydroxyl grppe tragen muss。Über diesen Weg kann Topo I prinzipiell ein重组dna修复[j]。Topo - 1是一种体外和体内重组修复细胞näher体外研究。本文对蛋白质蛋白的鉴定和功能特性进行了研究。[文献]肿瘤抑制蛋白p53在Topo - 1刺激下的多普勒schnittion和Topo - 1刺激下的多普勒schentretion和Topo - 1刺激下的多普勒schentretion，在der lebenenden Zelle之间的多普勒schention，在der orgeschlagenen修复机制näher untersucht werden。

Humane DNA-Topoisomerase I(Topo I) erkennt eine durch genotoxischen Stress induzierte torsinale Spannung in der DNA und versucht diese durch Strangbruch und anschließende Ligation zu entfernen. Befindet sich der Schaden in unmittelbarer Nähe zur Topo I-Bindungsstelle, misslingt der Ligationsversuch und Topo I bildet einen als "suizidal" bezeichneten kovalenten Komplex mit der geschädigten DNA. Die so fixierte Topo I kann aus dem suizidalen Komplex durch ein zweites Molekül desselben Enzyms in einer von uns als "Doppelschnitt" bezeichneten Reaktion freigesetzt werden. Hierbei entsteht eine ca. 13 Nucleotide umfassende Einzelstranglücke, die als Eintrittsstelle zur rekombinativen Freisetzung des zweiten Topo I-Moleküls genutzt werden kann. Hierfür wird ein komplementärer DNA-Einzelstrang benötigt, der an seinem 5'-Ende eine freie Hydroxylgruppe tragen muss. Über diesen Weg kann Topo I prinzipiell einen rekombinativen DNA-Reparaturweg einleiten. Die durch Topo I eingeleitete rekombinativen Reparatur soll in vivo und in vitro näher untersucht werden. Weitere an dieser Reparatur beteiligte Proteinfaktoren sollen identifiziert und funktionell charakterisiert werden. Da das Tumorsuppressorprotein p53 die Doppelschnittreaktion der Topo I stark stimuliert und da sowohl p53 als auch Topo I offensichtlich an der Fehlererkennung in der lebenden Zelle beteiligt sind, soll die Rolle von p53 am vorgeschlagenen Reparaturmechanismus näher untersucht werden.