Biosynthese und Funktionen der terminalen Glukuronsäure im Glukuronyl-T- und HNK-1-Antigen von Drosophila melanogaster

果蝇葡萄糖醛酰-T和HNK-1抗原中末端葡萄糖醛酸的生物合成和功能

• 批准号: 210549907
• 负责人: Professor Dr. Franz-Georg Hanisch, since 1/2013
• 金额: --
• 依托单位: Center for Molecular Medicine in Cologne (CMMC)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2010-12-31 至 2014-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/210549907?language=en
• 关键词: Biosynthese; und; Funktionen; der; terminalen

Da geladene Glykosylketten auf Lipiden und Proteinen bedeutende physiologische Funktionen in Ver-tebraten erfüllen, könnten ähnlich wichtige Funktionen von sauren Glykoproteinen und Glykolipiden in Drosophila vermittelt werden. Diese sind weitgehend unbekannt, daher könnte die Aufklärung der Biosynthese von glukuronylierten Glykanen in Drosophila elementare Erkenntnisse liefern. Da weder der letzte Schritt der Synthese von HNK-1 (GlcAβ1-3Galβ1-4GlcNAcβ-R) noch der des Glukuronyl-T-Antigens (GlcAβ1-3Galβ1-3GalNAcα-R) auf Glykolipiden und -proteinen in Drosophila bisher detailliert untersucht worden ist, könnten über ihre Aufklärung Hinweise auf die spezifischen Funktionen dieser Zuckerepitope erhalten werden. In dem hier beantragten Projekt sollen diese Syntheseschritte durch die Identifikation der für die terminale Verknüpfung der Glukuronsäure verantwortlichen Glykosyltransferase aufgeklärt werden. Die Ziele dieses Projektes sind, durch (1) die enzymatische Analyse der Drosophila Glukuronyltransferasen GlcAT-I, GlcAT-P und GlcAT-S in vitro und (2) durch ihre heterologe Expression im CHO-Lec2 Zellmodell und in vivo-Analysen die für die Synthese von HNK-1 und Glukuronyl-T verantwortliche Glykosyltransferase zu identifizieren. Dies ermöglicht uns (3) durch gerichtete Mutagenese des identifizierten Gens ihre Funktion im Drosophila Zellmodell und in Null-Mutanten zu untersuchen. Über die phänotypische Analyse und die Charakterisierung der verän-derten Glykosylierungsmuster wollen wir in diesen Mutanten Einblicke in die Funktionen der terminalen Glukuronsäure in Drosophila gewinnen.

糖基化对脂质和蛋白质的生理功能有显著影响，在果蝇中，糖蛋白和糖脂对韦尔登的生理功能有显著影响。这是一个不为人知的现象，因为在果蝇中，葡萄糖的生物合成是一个非常复杂的过程。通过对HNK-1（GlcA β 1-3Galβ1-4GlcNAcβ-R）在果蝇体内与糖脂和蛋白质结合的Glucuronyl-T-Antigens（GlcAβ1 - 3Galβ1-3GalNAcα-R）的合成方法的研究，可以发现其特异性功能的增强作用。在该项目中，通过对韦尔登基转移酶的终末Verknüpfung der Glukuronsäure的鉴定，解决了合成问题。本课题通过（1）果蝇GlcAT-I、GlcAT-P和GlcAT-S的体外酶学分析和（2）CHO-Lec 2细胞模型中的异源表达及体内HNK-1和GlcAT-T的合成分析鉴定。Dies ermöglicht uns（3）durch gerichtete Mutagenese des identifizierten Gens ihre functionin Drosophila Zellmodell and in Null-Mutanten zuuntersuchen.本文通过对果蝇糖基化终末功能的表型分析和糖基化终末功能的特征研究，探讨了果蝇糖基化终末功能的突变特征。