Identifizierung und Rekonstitution detergenzresistenter Membrandomänen in SÄugerspermien und deren Funktion bei der Befruchtung

哺乳动物精子中去污剂抗性膜结构域的鉴定和重建及其在受精中的功能

• 批准号: 22585892
• 负责人: Dr. Karin Müller
• 金额: --
• 依托单位: Leibniz-Institut für Zoo- und Wildtierforschung (IZW)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/22585892?language=en
• 关键词: Identifizierung; und; Rekonstitution; detergenzresistenter; Membrandom

Während der Genese von Säugerspermien erfolgt eine gezielte Vorbereitung der Spermienmembranen auf die finalen Fusionsprozesse der Befruchtung, wobei Modifikationen im Cho- lesterolgehalt eine Schlüsselstellung einnehmen. Die Resistenz cholesterolreicher Lipid-Protein-Komplexe gegenüber Detergenzien führte in zahlreichen Zelltypen zur Selektion funktioneller Membrandomänen. Im vorliegenden Projekt sollen unterschiedliche Detergenzien und Präparationsbedingungen auf verschiedenen Stufen der Genese (Reifung, Kapazitäten, Akrosomenreaktion) angewandt werden, um in Spermien befruchtungsrelevante Membrandomänen und deren Veränderungen im Bezug zu cholesterolmodifizierenden Prozessen zu identifizieren. Die zugrunde liegenden Lipidspezies werden mittels Chromatografie, Massenspektrometrie und NMR-Spektroskopie, die zugehörigen Proteine unter Nutzung elektrophoretischer Verfahren sowie Massenspektrometrie analysiert. Rekonstituierte Vesikel aus den präparierten Membranfraktionen werden bezüglich ihrer Wechselwirkung mit Seminalplasma, intrazellulären Strukturen des Spermiums (Zytoskelett, Akrosom) sowie Effektoren im weiblichen Genitaltrakt (Eileiter, Eizelle) untersucht, um nachfolgend die Funktion solcher Domänen in der intakten Zelle zu charakterisieren.

在精子膜最终融合过程中，Säugerspermien基因的变化导致精子膜的变异，在Cho- lesterolgehalt中的修饰导致一个Schlüsselstellung einnehmen。Die Resistenz cholesterolreicher Lipid-Protein-Complexe gegenüber Detergenzien führte in zahlreichen Zelltypen zur Selektion funktioneller Membrandomänen.在前一个项目中，我们需要对基因（Reifung、Kapazitäten、Akrosomenreaktion）的样本进行彻底的检测和准备，然后韦尔登，在精子中进行相关的膜分离，并在胆固醇修饰过程中进行鉴定。该研究主要涉及色谱、质谱和核磁共振等方法对韦尔登的分析，以及质谱分析中蛋白质的提取。Rekonstituierte Vesikel aus den den den den präparierten Membranfraktionen韦尔登werden bezüglich ihrer Wechselenkung mit Seminalplasma，intrazellulären Strukturen des Spermiums（Zytoelett，Akrosom）sowie Effektoren im weiblichen Genitaltrakt（Eileiter，Eizelle）untersucht，um nachfolgend die Foktion solcher Domänen in der intakten Zelle zu charakterisieren.