Einfluss von Amniomembran-Transplantationen auf Makrophagen bei experimenteller herpetischer stromaler Keratitis: Der Einfluss auf die Apoptose, Zellteilung und Funktion von Makrophagen

(1)关于羊膜移植（AMT）的研究进展：1 .关于羊膜移植（AMT）的研究进展：1 .关于羊膜移植的研究进展：本文研究了HSK （herpetischer stromaler Keratitis，简称HSK）中AMT （herpetischer stromaler Keratitis，简称HSK）、多态kernigen Zellen （PMN）和T- Zellen的凋亡。Wenige Stunden nach AMT (12h nach AMT) war in Transmissionselektronenmikroskop (TEM) eine vermehrte Zahl von Phagozyten mit phagozytierten tischen Zellkörpern delektiert worden。Unser tiermodel ermöglicht, antientznndlich Mechanismen bei hornhautentzndungen durch AMT zu untersuchen。Möglicherweise können neue antientzndliche Therapieansätze aufgrund dieser Erkenntnisse konzipiert werden。(1)骨髓巨噬细胞（cd1lb +/F4/80+ Zellen）在急性溃疡性疱疹性角膜炎中的移植及体外研究。在AMT-behandelten HSK-Hornhäuten sollen mittelels konfokaler mickroskopie die Kolokalisation von Makrophagenmarkern （CD11b, F4/80）和T Zellmarkern (CD3, CD4) mit kostimulatorischen molek<e:1> len untersucht werden。在Mittelpunkt中，Bei der Makrophagenpopulation检测了makrophagenmarker基因CD80 （B7.1）、CD86 （B7.2）、MHC-II和CD40的ko表达。CD3、CD28 （Ligand von CD80和CD86）、CD152 （CTLA4， Ligand von CD80和CD86）和CD40L)；untersucht了。Mittels酶联免疫吸附试验（ELISA）测定小鼠外周血中白细胞介素（IL-6、IL-12、TNF-a、IL-1）和趋化因子（CRG-2 （IP-10）、CCL2 (MCP-1)）的生成HornhäutenZudem werden die produczierten stickstofradikalgemessen。CD11b+ (TUNEL / F4/80+ der CD11b+)的研究进展。巨噬细胞增殖、Zytokin-、趋化因子和no -产生、吞噬蛋白（latexparticle, apoptosis - sche Zellen）和迁移(Boyden-Chamber, Hornhäute mit HSK untersucht Die Expression kostimulatorischer Signale and mittels Durchflußzytometrie untersucht （u.a. B7.1/2, MHC-II, CD40）的体外研究。hsv -1- spzifischt - zellenwerden分析试剂盒。Die antigen spezifische增殖与Die zytokin production (Th1/2) sollen dafr als Maßstab herangezogen werden。凋亡因子与促凋亡因子（TUNEL / F4/80+ o. cd11b +, active Effektorcaspasen）

Obschon unsere Arbeitsgruppe als auch andere eine antientzündliche Wirkung von Amnionmembran- Transplantation (AMT) bei Hornhautentzündungen beschrieben haben, ist der zugrunde liegende Mechanismus bislang unklar. Wir haben nach AMT bei ulzerativer herpetischer stromaler Keratitis (HSK) eine Apoptose von polymorphkernigen Zellen (PMN) und T- Zellen in der Hornhaut beobachtet. Wenige Stunden nach AMT (12h nach AMT) war im Transmissionselektronenmikroskop (TEM) eine vermehrte Zahl von Phagozyten mit phagozytierten apoptotischen Zellkörpern delektiert worden. Unser Tiermodell ermöglicht es, antientzündliche Mechanismen bei Hornhautentzündungen durch AMT zu untersuchen. Möglicherweise können neue antientzündliche Therapieansätze aufgrund dieser Erkenntnisse konzipiert werden. Ziel des Versuchsvorhaben ist es, den Einfluss von Amnionmembran (AM) als Transplantat auf Makrophagen (CD l lb+/F4/80+ Zellen) in Hornhäuten mit ulzerativer herpetischer stromaler Keratitis und in vitro zu untersuchen. In AMT-behandelten HSK-Hornhäuten sollen mittels konfokaler Mikroskopie die Kolokalisation von Makrophagenmarkern (CD11b, F4/80) und T Zellmarkern (CD3, CD4) mit kostimulatorischen Molekülen untersucht werden. Bei der Makrophagenpopulation steht die Ko-Expression von Makrophagenmarkern mit CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), MHC-II und CD40 im Mittelpunkt. Bei T-Zellen soll die Anwesenheit von CD3, CD28 (Ligand von CD80 und CD86), CD152 (CTLA4, Ligand von CD80 und CD86) und CD40L); untersucht werden. Mittels Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) soll die Produktion von makrophagenspezifischen Zytokinen (IL-6, IL-12, TNF-a, IL-1) und Chemokinen (CRG-2 (IP-10), CCL2 (MCP-1)) in den Hornhäuten untersucht werden. Zudem werden die produzierten Stickstoffradikale gemessen. Die Apoptose von ruhenden und aktivierten Makrophagen wird mittels Doppelfärbung (TUNEL / F4/80+ oder CD11b+) untersucht. In vitro wird der Einfluss von AM auf Makrophagen hinsichtlich ihrer Proliferation, Zytokin-, Chemokin- und NO-Produktion, Phagozytose (Latexpartikel, apoptotische Zellen) und Migration (Boyden-Chamber, Hornhäute mit HSK untersucht Die Expression kostimulatorischer Signale wird mittels Durchflußzytometrie untersucht (u.a. B7.1/2, MHC-II, CD40). Die akzessorischen Funktionen auf HSV-1-spezifische T-Zellen werden analysiert. Die antigen spezifische Proliferation und die Zytokinproduktion (Th1/2) sollen dafür als Maßstab herangezogen werden. Apoptosezeichen ruhender und aktivierter Makrophagen sollen durchflußzytometrisch analysiert werden (TUNEL / F4/80+ o. CD 11b+, aktive Effektorcaspasen).