Einfluss von Amniomembran-Transplantationen auf Makrophagen bei experimenteller herpetischer stromaler Keratitis: Der Einfluss auf die Apoptose, Zellteilung und Funktion von Makrophagen

我们的工作组也观察到了一种抗角化羊膜移植（AMT）的方法，这是一种不明确的机制。我们用AMT治疗了由多形核白细胞（PMN）和T-白细胞（T-Zellen）引起的急性疱疹性角膜基质炎（HSK）.在透射电子显微镜（TEM）中，AMT（AMT后12小时）的Stunden是一种由具有吞噬活性的Zellkörpern delektiert沃登组成的噬菌体的Vermehrte Zahl。Unser Tiermodell ermöglicht es，antientzündliche Mechanismen bei Hornhaitzündungen durch AMT zu untersuchen. Möglicherweise können neue antientzündliche Therapieansätze aufgrund dieser Erkenntnisse konzipiert韦尔登。羊膜（AM）对巨噬细胞（CD 1 lb+/F4/80+ Zellen）移植治疗角膜溃疡性疱疹性角膜基质炎的影响及其体外研究。在AMT-behandelten HSK-Hornhäuten中，必须使用具有韦尔登的巨噬细胞标记（CD 11 b，F4/80）和T Zellmarkern（CD 3，CD 4）的协同作用。在噬菌体群中，噬菌体标记物在Mittelpunkt中表达CD 80（B7.1）、CD 86（B7.2）、MHC-II和CD 40。Bei T-Zellen测定了CD 3、CD 28（CD 80和CD 86配体）、CD 152（CTLA 4，CD 80和CD 86配体）和CD 40 L的抗体。本文采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了韦尔登体内巨噬细胞特异性的细胞因子（IL-6、IL-12、TNF-α、IL-1）和趋化因子（CRG-2（IP-10）、CCL-2（MCP-1））的产生。因此韦尔登生产的胶粘剂是放射性的。用TUNEL / F4/80+或CD 11b+双标记法检测细胞凋亡。在体外，AM对巨噬细胞的增殖、细胞因子、趋化因子和NO的产生、吞噬作用（Latexpartikel，Lectotische Zellen）和迁移的影响（Boyden-Chamber，Hornhäute mit HSK untersucht）。B7.1/2，MHC-II，CD40）。HSV-1特异性抗体的作用由T-Zellen韦尔登进行分析。抗原特异性增殖和细胞因子产生（Th 1/2）可导致大规模疱疹韦尔登。通过韦尔登法检测巨噬细胞凋亡和活化。CD 11b+，活化的EffektorCaspasen）。

Obschon unsere Arbeitsgruppe als auch andere eine antientzündliche Wirkung von Amnionmembran- Transplantation (AMT) bei Hornhautentzündungen beschrieben haben, ist der zugrunde liegende Mechanismus bislang unklar. Wir haben nach AMT bei ulzerativer herpetischer stromaler Keratitis (HSK) eine Apoptose von polymorphkernigen Zellen (PMN) und T- Zellen in der Hornhaut beobachtet. Wenige Stunden nach AMT (12h nach AMT) war im Transmissionselektronenmikroskop (TEM) eine vermehrte Zahl von Phagozyten mit phagozytierten apoptotischen Zellkörpern delektiert worden. Unser Tiermodell ermöglicht es, antientzündliche Mechanismen bei Hornhautentzündungen durch AMT zu untersuchen. Möglicherweise können neue antientzündliche Therapieansätze aufgrund dieser Erkenntnisse konzipiert werden. Ziel des Versuchsvorhaben ist es, den Einfluss von Amnionmembran (AM) als Transplantat auf Makrophagen (CD l lb+/F4/80+ Zellen) in Hornhäuten mit ulzerativer herpetischer stromaler Keratitis und in vitro zu untersuchen. In AMT-behandelten HSK-Hornhäuten sollen mittels konfokaler Mikroskopie die Kolokalisation von Makrophagenmarkern (CD11b, F4/80) und T Zellmarkern (CD3, CD4) mit kostimulatorischen Molekülen untersucht werden. Bei der Makrophagenpopulation steht die Ko-Expression von Makrophagenmarkern mit CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), MHC-II und CD40 im Mittelpunkt. Bei T-Zellen soll die Anwesenheit von CD3, CD28 (Ligand von CD80 und CD86), CD152 (CTLA4, Ligand von CD80 und CD86) und CD40L); untersucht werden. Mittels Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) soll die Produktion von makrophagenspezifischen Zytokinen (IL-6, IL-12, TNF-a, IL-1) und Chemokinen (CRG-2 (IP-10), CCL2 (MCP-1)) in den Hornhäuten untersucht werden. Zudem werden die produzierten Stickstoffradikale gemessen. Die Apoptose von ruhenden und aktivierten Makrophagen wird mittels Doppelfärbung (TUNEL / F4/80+ oder CD11b+) untersucht. In vitro wird der Einfluss von AM auf Makrophagen hinsichtlich ihrer Proliferation, Zytokin-, Chemokin- und NO-Produktion, Phagozytose (Latexpartikel, apoptotische Zellen) und Migration (Boyden-Chamber, Hornhäute mit HSK untersucht Die Expression kostimulatorischer Signale wird mittels Durchflußzytometrie untersucht (u.a. B7.1/2, MHC-II, CD40). Die akzessorischen Funktionen auf HSV-1-spezifische T-Zellen werden analysiert. Die antigen spezifische Proliferation und die Zytokinproduktion (Th1/2) sollen dafür als Maßstab herangezogen werden. Apoptosezeichen ruhender und aktivierter Makrophagen sollen durchflußzytometrisch analysiert werden (TUNEL / F4/80+ o. CD 11b+, aktive Effektorcaspasen).