Einfluss einer schnellen Inaktivierung von Clathrin-Funktionen in einer Vertebratenzelllinie auf entscheidende zelluläre Prozesse

笼状蛋白是Hoch konserviertes蛋白质和wichtig für den inzellulären VesikelTransport。他说：“这是一件很重要的事情，我不知道该怎么做。他说：“我不知道该怎么做，也不知道该怎么做。”在zwei verschiedenen ansätzen染色体的cathrin-Mutanten erzeugen中，um diese Fehlerquelle auzuschlieüen，Möchte ich in nerhalb von Minuten inaktivierbar sind：Hitze-und Laserlicht-inaktivierbares clathrin.在Säugerzelllinienäuüerst schwierig duchführbar sind，Sich aber Nur so viele Artefakte vermeiden Lassen，Werde ich eine Vertebratenzellinie benutzen，die eine eine einzigartig hohe homologe rekombinationsrate aufweist.绅士们在这里看到了她的名字。麻省理工学院的所有工作都是这样的，它们都是纯合纯合的，所以才有了真正意义上的东西，因为它们都是用来运输的：z.ob clathrin-unabhängie Endozytoseswege Induzierbar sind che che he leche Faktoren daege indozytoswege Induzierbar sind che che le Faktoren de Lysosomenändert，ob das Rezeprecumetzung der Lysosomenändert，ob das Rezeprecumetzung der Lysosomenändert，ob das Rezepeprecometzung de Lysosomenändert，ob das Rezeprecumetzung der Lysosomenändert，ob das Rezepmensetzung der Lysosomenändert and ob das Rezepepre rezepn wird and ob es ebes Intersikicke ebes Interakmine：z.b.ob clathrin-unabhänGige Endozyosososeswege Induzierbar sind Sind Wed Webes Endozym-dung gibt.我不知道怎么回事，我不知道怎么回事。

Clathrin ist ein hoch konserviertes Protein und wichtig für den intrazellulären Vesikeltransport. Die Bedeutung von Clathrin-abhängigen und redundanten Endozyosewegen untersuchte man bisher mit verschiedenen ¿Knock down¿ Methoden. Sie haben aber den Nachteil, dass sich die Zelle bis zum Verschwinden des bis zu drei Tagen stabilen Clathrins adaptieren kann, und so das Versuchsergebnis verfälscht wird. Um diese Fehlerquelle auszuschließen, möchte ich in zwei verschiedenen Ansätzen chromosomale Clathrin-Mutanten erzeugen, die innerhalb von Minuten inaktivierbar sind: Hitze- und Laserlicht- inaktivierbares Clathrin. Da komplette Gendeletionen in Säugerzelllinien äußerst schwierig durchführbar sind, sich aber nur so viele Artefakte vermeiden lassen, werde ich eine Vertebratenzellinie benutzen, die eine einzigartig hohe homologe Rekombinationsrate aufweist. Gendeletionen sind hier einfach herstellbar. Mit diesen, für die mutanten Clathringene homozygoten Zelllinien, kann ich zum ersten Mal völlig neue Einblicke in zentrale Fragen des intrazellulären Vesikeltransportes bekommen: z.B. ob Clathrin-unabhängige Endozytosewege induzierbar sind und welche Faktoren dabei eine Rolle spielen, ob sich die Zusammensetzung der Lysosomen ändert, ob das Rezeptorrecycling gestört wird und ob es eine bestimmte Interaktionsabfolge während der ¿clathrin coated pit¿- Bildung gibt. Diese Erkenntnisse sind für die Grundlagenforschung und die angewandte medizinische Forschung wichtig, weil mit den hier vorgestellten Werkzeugen die Bedeutung von Clathrin klar herausgearbeitet werden kann.