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Identification and characterization of novel mammalian phospholipase C

新型哺乳动物磷脂酶 C 的鉴定和表征

基本信息

批准号：
21J00197
负责人：
村上千明
金额：
$ 3.08万
依托单位：
Chiba University (2022)Shimane University (2021)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ホスホリパーゼC（PLC）は，グリセロリン脂質を加水分解し，生理活性脂質のジアシルグリセロール（DG）を産生する酵素群である．哺乳類のPLCで，ホスファチジルコリン（PC）やホスファチジルエタノールアミン（PE）を基質とするPLCは，哺乳類にて活性発見後40年以上分子実体（遺伝子）が不明であった．最近，我々は，スフィンゴミエリン合成酵素関連タンパク質 (SMSr)がPE，PC，ホスファチジルイノシトール（PI）等を加水分解しDGを産生するmulti-glycerophospholipid PLC hydrolase（MG-PLC）活性を示す「新タイプのPLC」であることを発見した．本研究ではSMSr/MG-PLCの機能解析を行い，MG-PLCの分子機構を明らかにすることを目的とした．本年度の主な成果として下記の3つがある．①当該酵素の生理的意義の解析準備のため，SMSrノックアウトマウスを新たに作製した（千葉大学バイオメディカル研究センターとの共同研究）．②SMSrの他にPC-PLC活性を示す酵素群を同定するために，SMSrの触媒部位を指標にPLC候補タンパク質をデータベース上で検索し，複数の候補分子を見出した．興味深いことに， MG-PLCと配列類似性の高いSMS isoform 1 (SMS1)がin vitroでPC-PLC活性を有することを発見した（投稿準備中）．③SMS1およびSMSr/MG-PLCの機能を調べたところ，DGキナーゼζ（DGKζ）と当該酵素が相互作用することを見出した（投稿中）．すなわち，SMS1およびMG-PLCは生体内でDGKζに近接し，DGをDGKζに供給する可能性がある．なお，研究代表者の特別研究員辞退（常勤研究職への採用）に伴い，本提案研究課題は当該年度で終了となる．　本研究で得た成果を基に，引き続き新規PLC酵素群の機能解析を行う．

ホスホリパーゼ C (PLC) は, グリセロリン lipid を hydrolytic decomposition し, physiological activity of lipid のジアシルグリセロール (DG) を produce する enzyme group である. Mammals の PLC で, ホスファチジルコリン (PC) やホスファチジルエタノールアミン (PE) を matrix とする PLC は, mammals にて発 see after 40 years of molecular be active body (legacy 伝) が unknown であった. Recently, I have been engaged in 々, スフィゴゴゴ, ゴエリ, <e:1> synthesis enzymes associated with タパパ mass (SMSr)がPE, PC. ホスファチジルイノシトール (PI), and other を hydrolytic decomposition し DG を produce する multi - glycerophospholipid PLC hydrolase (MG - PLC) active を shown す "new タイプの PLC" であることを発 see した. This study では SMSr/MG - function of PLC の parsing をい, MG - PLC の molecular agency を Ming らかにすることを purpose とした. The main な achievement of this year とててて is recorded below と 3 があるがある. (1) when the meaning of the enzyme の physiological の parsing prepare のため, SMSr ノックアウトマウスを new たに cropping した (chiba university バイオメディカル research センターとの joint research). (2) SMSr の he に PC - PLC active group of をを shown す enzyme with fixed するために, SMSr の catalyst sites を index に PLC backup タンパク qualitative をデータベース on で検し, plural の alternate molecular を show the した. Deep interest: <s:1> とにとに, MG-PLCと configuration similar to <s:1> high <s:1> SMS isoform 1 (SMS1)がin vitroでPC-PLC activity をするするとを occurrence た (submission in preparation). (3) SMS1 および SMSr/MG - function of PLC のを adjustable べたところ, DG キナーゼ zeta (DGK zeta) と when the interaction between the enzyme がすることを shows した (contribute). すなわち, SMS1 および MG - PLC は born in vivo で DGK zeta に nearly し, DG を DGK zeta に supply する possibility がある. Youdaoplaceholder0, the representative of the research, the special researcher, is dismissed (the regular research position へ is adopted) に accompanied by なお, the research topic of this proposal is で at the end of that year となる. This study で obtained the た results を basis に, citing the を続続 <s:1> new regulation PLC enzyme group <s:1> function analysis を line う.