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ヒ素含有グリセロリン脂質の解析に基づいたヒ素の毒性発現メカニズムの衛生薬学的研究

基于含砷甘油磷脂分析的砷毒性机制的卫生学和药学研究

基本信息

批准号：
10877376
负责人：
工藤一郎
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、哺乳動物細胞のアルセノコリン(AsC)存在下における、ホスホリパーゼD(PLD)の反応によるホスファチジルアルセノコリン(PAsC)産生の可能性について検討した。また、PAsCの細胞増殖に与える影響について検討を行った。1:ヒト単核球系白血病細胞株U937細胞をホルボールエステル(PMA)で刺激すると、プロテインキナーゼCを介してPLDが活性化されることが既に報告されている。そこで、あらかじめ放射標識オレイン酸で細胞膜を標識したU937細胞をPMAで1時間刺激した。まず、PAsCと他の主要なリン脂質が区別できる2次元TLCの系を検討し、開発した。この系を用いて、刺激後の細胞から脂質を抽出した後、生成したPAsC量を測定した。その結果、PMAで刺激した細胞は未刺激細胞に比べ、有意にPAsC生成量が増加した。このことから、U937細胞をAsC存在下で1時間PMAにより刺激すると、PLDを介した経路でPAsCが生成される可能性が示唆された。2:U937細胞をPAsCの産生が検出できた上で示した条件に基づきPMAで刺激した後、AsCを洗浄して除きさらに培養を24時間続けた。24時間後の細胞数を数え、PAsCの細胞増殖に与える影響を検討した結果、コリン存在下でPMAにより刺激を行いPCを産生させた場合と比べ、細胞増殖の促進傾向が観察された。この傾向は未処理細胞では観察されなかった。以上の結果より、高等動物細胞において細胞内でPAsCが産生され、さらに生成されたPAsCが細胞増殖に何らかの影響を与える可能性が示唆された。

This year, the possibility of the production of PAsC in mammalian cells in the presence of AsC was investigated. PAsC cell proliferation and its influence on cell proliferation 1. Single lineage leukemia cell line U937 cells were stimulated and activated by PLD. U937 cells were stimulated with PMA for 1 hour. 2-D TLC system is discussed and developed. The amount of PAsC produced after stimulation was measured. PAsC production increased significantly in PMA-stimulated cells compared with unstimulated cells. The possibility of PAsC production in U937 cells stimulated by PMA and mediated by PLD in the presence of AsC was demonstrated. 2:U937 cells were cultured for 24 hours after PAsC production and stimulation. 24 hours later, the number of cells, PAsC cell proliferation and its effects were investigated. Results, PMA stimulation and PC production in the presence of PAsC were investigated. The tendency of untreated cells to detect the presence of the virus. The above results raise the possibility that PAsC is produced in cells of higher animals and that the produced PAsC may have an impact on cell proliferation.