ヒ素含有グリセロリン脂質の解析に基づいたヒ素の毒性発現メカニズムの衛生薬学的研究

基于含砷甘油磷脂分析的砷毒性机制的卫生学和药学研究

• 批准号: 10877376
• 负责人: 工藤 一郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877376/
• 关键词: ヒ素; アルセノコリン; ホスファチジルアルセノコリン; ホスホリパーゼD; ホスファチジル基転移反応

本年度は、哺乳動物細胞のアルセノコリン(AsC)存在下における、ホスホリパーゼD(PLD)の反応によるホスファチジルアルセノコリン(PAsC)産生の可能性について検討した。また、PAsCの細胞増殖に与える影響について検討を行った。1:ヒト単核球系白血病細胞株U937細胞をホルボールエステル(PMA)で刺激すると、プロテインキナーゼCを介してPLDが活性化されることが既に報告されている。そこで、あらかじめ放射標識オレイン酸で細胞膜を標識したU937細胞をPMAで1時間刺激した。まず、PAsCと他の主要なリン脂質が区別できる2次元TLCの系を検討し、開発した。この系を用いて、刺激後の細胞から脂質を抽出した後、生成したPAsC量を測定した。その結果、PMAで刺激した細胞は未刺激細胞に比べ、有意にPAsC生成量が増加した。このことから、U937細胞をAsC存在下で1時間PMAにより刺激すると、PLDを介した経路でPAsCが生成される可能性が示唆された。2:U937細胞をPAsCの産生が検出できた上で示した条件に基づきPMAで刺激した後、AsCを洗浄して除きさらに培養を24時間続けた。24時間後の細胞数を数え、PAsCの細胞増殖に与える影響を検討した結果、コリン存在下でPMAにより刺激を行いPCを産生させた場合と比べ、細胞増殖の促進傾向が観察された。この傾向は未処理細胞では観察されなかった。以上の結果より、高等動物細胞において細胞内でPAsCが産生され、さらに生成されたPAsCが細胞増殖に何らかの影響を与える可能性が示唆された。

This year は, mammalian cells の ア ル セ ノ コ リ ン (AsC) in the presence of に お け る, ホ ス ホ リ パ ー ゼ D (PLD) の anti 応 に よ る ホ ス フ ァ チ ジ ル ア ル セ ノ コ リ ン (PAsC) produce の possibility に つ い て beg し 検 た. Youdaoplaceholder0, PAsC <s:1> cell proliferation に and える effects に った て検 て検 を row った. 1: ヒ ト 単 bulge of leukemia cell line U937 cells を ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル (PMA) で stimulation す る と, プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ を C interface し て PLD が activeness さ れ る こ と が に report both さ れ て い る. そ こ で, あ ら か じ め radiation logo オ レ イ で ン acid membrane を logo し た U937 cells を PMA で 1 time stimulate し た. Youdaoplaceholder0, PAsCと the main <s:1> lipids が are different で る る る る the two-dimensional TLC <s:1> is を検 to discuss を検 and develop た. The <s:1> <s:1> is determined by を using を て to extract the <s:1> lipids を from the <s:1> cells after stimulation, and then the amount of <s:1> たPAsC generated を is used to measure the た. The そ そ results showed that PMAで stimulated the production of <s:1> た cells and <s:1> unstimulated cells に increased the production of にPAsC by た compared with べ and intentionally に. こ の こ と か ら, U937 cells を AsC で 1 time in the presence of PMA に よ り stimulus す る と, PLD を interface し た 経 road で PAsC が generated さ れ が る possibility in stopping さ れ た. 2: U937 cells を PAsC の produce が 検 out で き で shown on た し た conditions に base づ き PMA で stimulus し た after incorporated, AsC を し て in addition to き さ ら に cultivate を 24 time 続 け た. After 24 time の cell count を え, PAsC の に cells raised colonization and え る influence を beg し 検 た results, コ リ ン で in the presence of PMA に よ り stimulates production line を い PC を さ せ と た occasion than べ の promote tendency, cell rights colonization が 観 examine さ れ た. The <s:1> <s:1> tendency is that untreated cells で 観 観 are observed at されな った った. の above results よ り, higher animal cell に お い て in cells で PAsC が produce さ れ, さ ら に generated さ れ た PAsC が cells raised colonization に what ら か の influence を and え が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Murakami, M.et al.: "Functional coupling between various phospholipase A_2s and cyclooxygenases in immediate and delayed prostanoid biosynthetic pathways." J.Biol.Chem.274. 3103-3115 (1999)

Murakami, M.等人：“各种磷脂酶 A_2 和环氧合酶在立即和延迟前列腺素生物合成途径中的功能耦合。”

Murakami, M. et al.: "Functional association of type IIA sPLA_2 with the GPI-Anchored heparan sulfate proteoglycan in the COX-2-mediated delayed PG biosynthetic pathway"J. Biol. Chem.. 274. 29927-29936 (1999)

Murakami, M. 等人：“IIA 型 sPLA_2 与 COX-2 介导的延迟 PG 生物合成途径中 GPI 锚定的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的功能关联”J.