Investigation on viral inhibitory effects of food ingredients.

本研究では、新型コロナウイウルスSARS-CoV-2をモデルとしてウイルス感染症の抑制機能を有する食品素材の探索を行い、有効成分を特定することで食品等の利活用による健康維持・増進技術の解明につながる基礎的知見を得ることを目的としている。初年度から次年度にかけ、スクリーニング系の確立と、有望素材の選抜を行った。すなわち 1. SARS-CoV-2 Spikeタンパク質とその受容体ACE2を用いた複数種のELISA系によるウイルス結合阻害活性評価系、2. ウイルスの細胞融合を促進するプロテアーゼTMPRSS2阻害活性評価系、3. 感染によるサイトカインストームを模倣したHeLa細胞によるIL-6過剰発現阻害活性評価系により、北東北の農林水産物（約500種）から作製した抽出物ライブラリーから有望素材の選抜を行った。実際には、近縁種等を考慮して約110種の代表的素材の抽出物を評価し、1. ウイルス結合阻害素材として、緑茶、コシャク、ヤマミズ、甘茶、セリ、アカモク等、3. IL-6発現抑制素材としてカリン、ヤーコン、ケンポナシ、食用菊、クラブアップル、ゴールデンベリーなどを選抜した。2. TMPRSS2は市販酵素の安定性に問題があり、酵母による組換えTMPRSS2の作製を実施した。有効成分特定について、1. ウイルス結合阻害成分を甘茶から単離同定を行い、既報の抗ウイルス成分であるNaringeninおよび、新たな有効成分として、Dihydroisocoumarins（phyllodulcin and hydrangenol）の同定に成功した。3. IL-6発現阻害成分についてゴールデンベリーの葉に含有されるwithanolide類を特定し、4beta-hydrxywithanolide Eおよびwithanolide Eが主たる阻害成分の一つであることが明らかとなった。

本研究では、新型コロナウイウルスSARS-CoV-2をモデルとしてウイルス感染症の抑制機能を有する食品素材の探索を行い、有効成分を特定することで食品等の利活用による健康維持・増進技術の解明につながる基礎的知見を得ることを目的としている。初年度から次年度にかけ、スクリーニング系の確立と、有望素材の選抜を行った。すなわち 1. SARS-CoV-2 Spikeタンパク質とその受容体ACE2を用いた複数種のELISA系によるウイルス結合阻害活性評価系、2. ウイルスの細胞融合を促進するプロテアーゼTMPRSS2阻害活性評価系、3. 感染によるサイトカインストームを模倣したHeLa細胞によるIL-6過剰発現阻害活性評価系により、北東北の農林水産物（約500種）から作製した抽出物ライブラリーから有望素材の選抜を行った。実際には、近縁種等を考慮して約110種の代表的素材の抽出物を評価し、1. ウイルス結合阻害素材として、緑茶、コシャク、ヤマミズ、甘茶、セリ、アカモク等、3. IL-6発現抑制素材としてカリン、ヤーコン、ケンポナシ、食用菊、クラブアップル、ゴールデンベリーなどを選抜した。2. TMPRSS2は市販酵素の安定性に問題があり、酵母による組換えTMPRSS2の作製を実施した。有効成分特定について、1. ウイルス結合阻害成分を甘茶から単離同定を行い、既報の抗ウイルス成分であるNaringeninおよび、新たな有効成分として、Dihydroisocoumarins（phyllodulcin and hydrangenol）の同定に成功した。3. IL-6発現阻害成分についてゴールデンベリーの葉に含有されるwithanolide類を特定し、4beta-hydrxywithanolide Eおよびwithanolide Eが主たる阻害成分の一つであることが明らかとなった。