权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

精子形成減数分裂期以降における完全な翻訳抑制と部分的な翻訳抑制の機構

精子发生减数分裂阶段后完全和部分翻译抑制的机制

基本信息

批准号：
21K05498
负责人：
柏原真一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05498/
关键词：
精子形成翻訳制御 RNA結合タンパク質精細胞

项目摘要

精子形成における翻訳制御に関して、令和4年度では以下の点を明らかにした。①ショ糖密度勾配遠心によりマウス精巣抽出液を、mRNAをほとんど含まない画分（トップ画分）、翻訳が抑制されたmRNAが含まれるmRNP画分、および翻訳が行われているポリソーム画分に分画し、オリゴ(dT)セルロースによるプルダウンを行った。プルダウン産物について、各タンパク質バンドをPMF解析により同定した。その結果、mRNP画分の主要構成タンパク質は、ポリソーム画分と同様、ポリ(A)鎖結合タンパク質PABPC1とY-box RNA結合タンパク質YBX2であることが判明した。令和3年度でのノックアウトマウスを用いた解析により、YBX2はグローバルな翻訳抑制にもmRNAの安定化にも重要ではないことが強く示唆されている。したがって、微量に含まれる未同定因子が、翻訳抑制におけるmRNP形成の「核」となっている可能性が考えられた。②予想に反し、トップ画分において多くのRNA結合タンパク質がプルダウンされた。プルダウンされたタンパク質は主に、mRNA前駆体に結合するhnRNPファミリータンパク質であった。これらタンパク質は普遍的に存在するが、精巣のような翻訳制御がほとんど行われない肝臓の同画分ではプルダウンされなかった。したがって、hnRNPファミリータンパク質が、精巣細胞質において一過的にmRNAに結合することにより、翻訳抑制に関与している可能性が考えられた。③抗EIF4E抗体を用いた精巣抽出液の免疫沈降により、肝臓ではみられないEIF4E結合因子を検出することができた。④精巣特異的に存在するPABPC6に関する研究の過程で、本タンパク質が普遍的なPABPC1とは異なり、翻訳不活性画分にのみ分布すること、またクロマトイドボディに濃縮されていることなどから、グローバルな翻訳抑制に関与することが示唆された。

Spermatogenesis is controlled by the following factors: (1) The concentration of sugar in the extract, mRNA, mRNA The PMF analysis is based on the quality of the product and the quality of the product. As a result, the main components of mRNP analysis were identified as follows: quality, diversity, similarity, diversity (A), combination of quality PABPC1 and Y-box RNA, combination of quality YBX2. In the third year of this year, YBX2 was used to analyze and stabilize mRNA. The possibility of "nucleus" formation of mRNP is examined. (2) The RNA binding protein was prepared by the method of reverse transcription. In addition, the mRNA precursor is bound to the protein. The quality of the product is universal, and the quality of the product is universal. The possibility of mRNA binding in the cytoplasm of the sperm and the inhibition of transcription was examined. Anti-EIF 4E antibodies were detected by immunoprecipitation of sperm extract and liver extract. (4) The existence of specific PABPC6 related to the study process, the nature of the substance, the prevalence of PABPC1, the distribution of inactive components, the concentration of active components, the inhibition of active components and the expression of active components.