長期維持型卵胞の形成増強法の開発および卵胞動態制御への影響の解析

哺乳類の卵巣では未成熟期から発育を開始する早期発育型卵胞と性成熟後まで休眠・維持されて生殖寿命後期の卵子産生に寄与する長期維持型卵胞が形成されることが明らかになってきた。本研究では、長期維持型卵胞形成の増強により雌の生殖寿命を延長することは可能か、また、早期発育型卵胞の減少が卵胞動態への影響を与えるかを解析しようとしており、そのために長期維持型卵胞を形成する顆粒層前駆細胞の採取、解析、細胞の追加や機能性因子による操作等を行うことを計画している。本年度は、マウス胎仔／新生仔卵巣において長期維持型顆粒層前駆細胞と推定されているLgr5発現細胞と同じ細胞集団において高発現であったという報告があるGng13の機能解析の一環として、前年度から継続してマウス胎仔卵巣の器官培養系においてGタンパク質シグナル伝達経路に対する刺激の効果を検討した。現在までの解析では（全体的なサイズの変化が発生しているようであるものを保留など未解析あり）、検討範囲内での高濃度添加区の組織標本で対照区と比較して卵巣中央部の断面のアスペクト比の低下が認められたが、その他には計測された卵胞数が平均としてはやや上昇したが有意な変化ではなく、卵胞発育段階の構成比等においても変化は見られなかった。また、刺激剤に含まれていた添加物の影響が考えられたので、異なるメーカーの試薬での追加実験を試みたがこれにも同種の添加物が含まれており、予定を変更して、先の実験での高濃度添加区と同じ濃度での処理を培養の前半または後半に行うことにより添加時期の効果を検討した。年度内に解析した標本では、前半に添加を行った処理区で全期間添加区と類似した断面のアスペクト比の変化が見られたが、その他の要素については卵巣間の変動が大きく一定した傾向は見られなかった。

哺乳類の卵巣では未成熟期から発育を開始する早期発育型卵胞と性成熟後まで休眠・維持されて生殖寿命後期の卵子産生に寄与する長期維持型卵胞が形成されることが明らかになってきた。本研究では、長期維持型卵胞形成の増強により雌の生殖寿命を延長することは可能か、また、早期発育型卵胞の減少が卵胞動態への影響を与えるかを解析しようとしており、そのために長期維持型卵胞を形成する顆粒層前駆細胞の採取、解析、細胞の追加や機能性因子による操作等を行うことを計画している。本年度は、マウス胎仔／新生仔卵巣において長期維持型顆粒層前駆細胞と推定されているLgr5発現細胞と同じ細胞集団において高発現であったという報告があるGng13の機能解析の一環として、前年度から継続してマウス胎仔卵巣の器官培養系においてGタンパク質シグナル伝達経路に対する刺激の効果を検討した。現在までの解析では（全体的なサイズの変化が発生しているようであるものを保留など未解析あり）、検討範囲内での高濃度添加区の組織標本で対照区と比較して卵巣中央部の断面のアスペクト比の低下が認められたが、その他には計測された卵胞数が平均としてはやや上昇したが有意な変化ではなく、卵胞発育段階の構成比等においても変化は見られなかった。また、刺激剤に含まれていた添加物の影響が考えられたので、異なるメーカーの試薬での追加実験を試みたがこれにも同種の添加物が含まれており、予定を変更して、先の実験での高濃度添加区と同じ濃度での処理を培養の前半または後半に行うことにより添加時期の効果を検討した。年度内に解析した標本では、前半に添加を行った処理区で全期間添加区と類似した断面のアスペクト比の変化が見られたが、その他の要素については卵巣間の変動が大きく一定した傾向は見られなかった。