Mechanism of Notch receptor signaling and its dependency on lipids

Notch受体信号传导机制及其对脂质的依赖性

• 批准号: 21K06038
• 负责人: 佐藤 毅
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kyoto Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06038/
• 关键词: Notch; 生体膜; 半合成; Notchシグナリング; 分子動力学計算; Notch受容体; Ligation; 膜タンパク質; 情報伝達; 固体NMR

Notchシグナリングは生体の恒常性維持に関与する。Notch受容体はリガンド結合依存的に膜内切断により自身の細胞質内領域である転写因子を細胞内へ放出するが、その活性化機構にはcontext dependencyが存在する。つまり、異なるリガンドが同種受容体に結合し、類似の機構で同様の転写因子を産出するが、その結果は何らかのcontextに応じて、異なる遺伝子の活性化として観察される。その機構は未知であり、我々は脂質依存的なNotch受容体の構造、clusteringの差異がこのcontext dependencyを与えると考え、その機構の構造化学的解析を行うこととした。22年度は膜中における構造解析を想定したNotch受容体とリガンドDll4の調製も開始した。まず、Dll4に関して蛍光プローブ等の標識を導入すべく、それら蛋白質の半合成を行うにあたり、各合成ブロックの調製を開始した。現時点ではDll4のC末端側合成ブロックの大腸菌による発現、精製を完了するに至っている。さらにそのN末端合成ブロックの化学合成は昨年度完了していたが、その単離に問題があった。今年度は、その問題を解消するに至った。今後はそれら合成ブロックのligation法による縮合条件の検討行う。一方、膜貫通部位の化学合成には成功しており、現在、脂質二重層への包埋を評価している。

Notchシグナリ グ グ グ グ is related to the maintenance of <s:1> homeostasis in the body に and する. Notch by let body は リ ガ ン ド combination of interdependent に membrane is cut に よ り itself the cytoplasm area の で あ る へ release planning write factor を cell す る が, そ の activeness institutions に は context dependency が exist す る. つ ま り, different な る リ ガ ン ド が same let body に combining し, with others in similar の institutions で の planning write factor を output す る が, そ の what results は ら か の context に 応 じ て, different な る posthumous son 伝 の activeness と し て 観 examine さ れ る. そ の institutions は unknown で あ り, I 々 は lipid dependent な Notch is の let body structure, clustering is の differences が こ の context dependency を and え る と え test, そ の line agencies の tectonic chemical analytical を う こ と と し た. Analysis of the における structure in the <s:1> membrane in 2022 を determination of the <s:1> たNotch acceptor とリガ ド ドDll4 <s:1> modulation における initiation た た た. ま ず, Dll4 に masato し て 蛍 light プ ロ ー ブ etc. の logo を import す べ く, そ れ ら protein の semisynthetic を line う に あ た り, various synthetic ブ ロ ッ ク の modulation を began し た. At the current point, the terminal side of で で Dll4 <e:1> C is synthesized to ブロッ <e:1> <s:1> coliform bacteria による, and the refining is を completed するに to って る る る. Youdaoplaceholder0 <s:1> n-terminal synthesis ブロッ ブロッ <s:1> chemical synthesis があった the last year 's completion of <s:1> て たが たが and そ 単 are related to に issues があった. This year, the を and そ problems will be resolved from するに to った. In the future, それら それら will be synthesized into ブロッ ブロッ <s:1> ligation method による condensation conditions <s:1> 検 to discuss う. On the one hand, the <s:1> chemical synthesis of the membrane penetration site に was successful, てお てお てお, now, lipid bilayer へ <s:1> encapsulation を evaluation 価 て て る る.

项目成果

Total Synthesis and Structural Characterization of Caveolin-1

• DOI: 10.1002/anie.202100826
• 发表时间: 2021-05-11
• 期刊: ANGEWANDTE CHEMIE-INTERNATIONAL EDITION
• 影响因子: 16.6
• 作者: Hojo, Hironobu;Takei, Toshiki;Hirabayashi, Yoshio
• 通讯作者: Hirabayashi, Yoshio

Threonine phosphorylation regulates the molecular assembly and signaling of EGFR in cooperation with membrane lipids.

苏氨酸磷酸化与膜脂协同调节 EGFR 的分子组装和信号传导。

• DOI: 10.1242/jcs.260355
• 发表时间: 2022
• 期刊: J Cell Sci.
• 作者: 2)Ryo Maeda;Hiroko Tamagaki-Asahina;Takeshi Sato;Masataka Yanagawa;Yasushi Sako.
• 通讯作者: Yasushi Sako.

Effect of hydrophobic moment on membrane interaction and cell penetration of apolipoprotein E-derived arginine-rich amphipathic α-helical peptides.

• DOI: 10.1038/s41598-022-08876-9
• 发表时间: 2022-03-23
• 期刊: Scientific reports
• 影响因子: 4.6
• 作者: Takechi-Haraya Y;Ohgita T;Kotani M;Kono H;Saito C;Tamagaki-Asahina H;Nishitsuji K;Uchimura K;Sato T;Kawano R;Sakai-Kato K;Izutsu KI;Saito H
• 通讯作者: Saito H