权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

オーファン受容体Adgrf5による糸球体濾過障壁の恒常性維持機構の解明

孤儿受体 Adgrf5 阐明肾小球滤过屏障的稳态机制

基本信息

批准号：
21K06167
负责人：
中村信大
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06167/
关键词：
GPCR 血管内皮腎臓糸球体受容体血管細胞内情報伝達

项目摘要

本研究は、糸球体血管内皮細胞におけるAdgrf5の作用機構をshear stress応答に着目してその細胞内情報伝達経路を明らかにし，Adgrf5シグナリングが関与する濾過障壁の構造維持とその異常による病態発症の分子機構を解明すること目的としている。今年度は、１）Shear stress応答時のAdgrf5シグナリングの解明と２）血管内皮透過性に関与する細胞構造体への影響の解明にむけて解析を行った。１）については、前年度にADGRF5とshear stress応答との関係を見いだせなかったが、その後の解析によってADGRF5をの発現量の高い安定発現株を作製したところ、ERK1/2のリン酸化が定常状態で上昇することを認めた。このリン酸化はADGRF5をノックダウンすると低下したことから特異性があるものと判断した。さらに、この細胞株に対してシェアストレス刺激を与えると、コントロール細胞に比べてERK1/2のリン酸化応答が長時間持続することを認めた。以上の結果から、ADGRF5はシェアストレスによる細胞応答を増強する効果があることが示唆された。２）については、腎臓切片に対してトマトレクチンを用いたグリコカリックスの染色を行ったところ、ADGRF5欠損マウスでは野生型マウスに比べて毛細血管内皮における染色強度が弱かった。また、定量PCR解析によって糸球体内のMMP-9（グリコカリックスを分解することで知られる）の遺伝子発現量がADGRF5欠損マウスで低下していた。前年度のグリコカリックス構成分子の遺伝子発現低下と併せると、ADGRF5欠損によりグリコカリックス形成不全が生じて糸球体濾過障壁の機能異常が引き起こされているものと考えられた。

This study aims to elucidate the mechanism of shear stress response in Adgrf5 in human vascular endothelial cells and the intracellular signaling pathways involved in the structural maintenance of the filtration barrier. This year, 1) the analysis of Adgrf5 in response to Shear stress and 2) the analysis of the relationship between vascular endothelial permeability and the effect of cellular architecture. 1) The relationship between ADGRF5 and shear stress in the previous year was analyzed. The high and stable occurrence of ADGRF5 was controlled by ERK1/2 and the steady state of acidification was increased. ADGRF5 - 100 In addition, these cell lines were stimulated by ERK1/2 and maintained for a long time. The above results show that ADGRF5 has increased its response to the virus. 2) The staining intensity of ADGRF5 is weaker than that of the capillary endothelium. The amount of MMP-9 in the body was analyzed by quantitative PCR, and the amount of MMP-9 in the body was reduced due to the lack of ADGRF5. In the past year, the molecular component of the molecule has been reduced and the ADGRF5 has been damaged. The spherical filter barrier has been abnormal.