イオン輸送性上皮細胞に局在する新しいカリウムチャネル(Kir7.1)の機能解析

位于离子传输上皮细胞中的新钾通道（Kir7.1）的功能分析

• 批准号: 00J10226
• 负责人: 中村 信大
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J10226/
• 关键词: イオンチャネル; カリウムチャネル; 上皮細胞; 輸送制御

"Kir7.1の細胞膜への輸送機構の解析"いくつかのKirチャネルではその細胞内領域が細胞膜への輸送調節に関わることが報告されていることから,Kir7.1の細胞内領域を段階的に欠失させた変異体を作成し,これらを培養細胞に発現させた時に細胞内局在が変化するか調べた。その結果,C末端領域部分を一部欠いた変異体では細胞膜ではなくエンドゾーム様の局在をすることを明らかにし,Kir7.1においても細胞膜移行に関わるモチーフが存在する可能性があることを示すことができた。"新規RINGフィンガー分子Kdg1の機能解析"Kir7.1の遺伝子構造を解析していた過程で,ラットKir7.1の遺伝子のイントロン内において機能未知の新規遺伝子(Kdg1)を発見し同定した。Kdg1はKir7.1に似た膜二回貫通様の構造をとるRINGフィンガータンパク質であることから,Ki7.1の活性調節因子ではないかと予想し解析を進めた。免疫沈降実験や電気生理学的解析の結果,Kdg1とKir7.1との物理的相互作用やチャネル活性の変化が認められないことから,Kdg1がKi7.1の活性調節因子である可能性は低いものと考えられた。さらなる解析によって,Kdg1はリサイクリングエンドゾームに局在する膜タンパク質であることを明らかにし,Kdg1を過剰発現させるとトランスフェリンの取り込み阻害やトランスフェリン受容体の分解促進が生じ,これらの効果はKdg1のユビキチンリガーゼ活性能をもつRINGフィンガードメインに依存することを明らかにした。最近では,RINGフィンガー分子によるタンパク質のユビキチン化が,エンドゾーム・リソソームへ輸送される際の選別シグナルになることが報告されている。以上の解析結果からKdg1がリサイクリング経路の輸送制御に機能する可能性を示すことができた。

"Kir7.1 の membrane へ の transportation agency の parsing" い く つ か の Kir チ ャ ネ ル で は そ field が の cell membranes へ の conveying adjust に masato わ る こ と が report さ れ て い る こ と か ら, Kir7.1 の intracellular domain を Duan Jie に owe lost さ せ た - variant を し consummate, こ れ ら を culture cell に 発 now さ せ た に cells The game is in the が change of する. そ の results, part C terminal field を a owe い た - variant で は membrane で は な く エ ン ド ゾ ー ム others の bureau in を す る こ と を Ming ら か に し, Kir7.1 に お い て も transitional cell membrane に masato わ る モ チ ー フ が exist す る possibility が あ る こ と を shown す こ と が で き た." New rules RING フ ィ ン ガ ー molecular Kdg1 の function resolution "Kir7.1 の heritage 伝 sub structure analytical し を て い で た process, ラ ッ ト Kir7.1 の posthumous son 伝 の イ ン ト ロ ン within に お い て function unknown の new rules but 伝 child (Kdg1) を 発 see し with fixed し た. Kdg1 は Kir7.1 に like た film second time through others の tectonic を と る RING フ ィ ン ガ ー タ ン パ ク qualitative で あ る こ と か ら, Ki7.1 の activity regulating factor で は な い か と to think し parsing を into め た. Immune sink be 験 や electric 気 analytical の result of physiology, Kdg1 と Kir7.1 と の physical interactions や チ ャ ネ の ル activity - the が recognize め ら れ な い こ と か ら, Kdg1 が Ki7.1 の activity regulating factor で あ る は unlikely い も の と exam え ら れ た. さ ら な る parsing に よ っ て, Kdg1 は リ サ イ ク リ ン グ エ ン ド ゾ ー ム に bureau in す る membrane タ ン パ ク qualitative で あ る こ と を Ming ら か に し, Kdg1 を before turning 発 now さ せ る と ト ラ ン ス フ ェ リ ン の take り 込 み resistance against や ト ラ ン ス フ ェ リ ン by body promote が raw じ の decomposition, こ れ ら の unseen fruit は Kdg1 の ユ ビ キ チ ン リ ガ ー ゼ activity can を も つ RING フ ィ ン ガ ー ド メ イ ン に dependent す る こ と を Ming ら か に し た. Recent で は, RING フ ィ ン ガ ー molecular に よ る タ ン パ ク qualitative の ユ ビ キ チ ン が, エ ン ド ゾ ー ム · リ ソ ソ ー ム へ conveying さ れ る interstate の choose don't シ グ ナ ル に な る こ と が report さ れ て い る. Analytical results above の か ら Kdg1 が リ サ イ ク リ ン グ の 経 road transportation system function of royal に す を る possibility in す こ と が で き た.

项目成果

Suzuki, Y.: "Expression of the K^+ channel Kir7.1 in developing rat kidney : role in K^+ excretion"Kidney Int.. (in press). (2003)

Suzuki, Y.：“大鼠肾脏发育中 K^ 通道 Kir7.1 的表达：K^ 排泄中的作用”Kidney Int..（出版中）。