赤血球期マラリア原虫の特異的なイオンチャネル形成機構におけるRON3の機能解明

阐明RON3在红系阶段疟原虫特异性离子通道形成机制中的功能

基本信息

  • 批准号:
    21K06989
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.75万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

トリメトプリム(TMP)存在下で安定化する大腸菌由来ジヒドロ葉酸還元酵素を基盤とする不安定化ドメイン(DDD)とHAタグをRON3のC末端に付加したRON3-DDD原虫はTMP非存在下で生存できず、輪状体で発育不全を起こす。本研究ではTMP非存在下におけるRON3タンパク質の性状と機能を解析した。RON3は赤血球侵入型原虫で発現してN末断片(RON3N)とC末断片(RON3C)にプロセシングされるが、約60%のプロセシング阻害と約40%の原虫の侵入不全が認められた。侵入後の輪状体ではRON3Cの消失が確認され、時間経過による寄生胞膜チャネル活性の上昇は認められなかった。また赤血球侵入型原虫の分泌小胞から寄生胞に分泌されるRESAは赤血球膜に輸送されたのに対して、輪状体から分泌されるSBP1は約60%が赤血球膜に輸送されず、約60%の赤血球膜チャネル活性の低下が認められた。以上の結果から、RON3のプロセシングは赤血球侵入に重要であり、RON3Nは侵入直後の寄生胞膜チャネル形成、および赤血球膜にタンパク質を輸送するトランスロコン形成、RON3Cは寄生胞膜チャネルの増加に必要となる原虫細胞膜から寄生胞膜へのタンパク質輸送に関与することが示唆された。現在これらの成果について査読付き英文論文を投稿中である。当初の目的であるRON3相互作用分子の同定については、RON3NとRON3Cが複合体を形成することを明らかにし、この複合体形成がチャネル形成に重要であることが示唆された。当初予定していたTMP存在下、および非存在下におけるHAタグを用いた免疫沈降産物の比較ができないため、代替案として近位依存性ビオチン化酵素AirID をRON3のC末端に付加したRON3-AirID原虫を作出した。これまでにRON3自身がビオチン化されたと考えられる分子量以外に複数のシグナルを検出している。
The origin of E. coli in the presence of TMP is folate-reducing enzyme, the substrate is destabilized (DDD), HA is added to the C-terminal of RON-3, and the rotavirus in the absence of TMP starts to develop. In this study, we analyzed the properties and functions of TMP in the absence of TMP. RON-3 is a red blood cell invasive protozoan. It is found that the N terminal fragment (RON-3N) and C terminal fragment (RON-3C) are not completely detected. About 60% of the protozoan invasion is blocked. After invasion, RON3C disappeared and parasite membrane activity increased. The secretion of erythroid invasive protozoa from secretory vesicles to parasitic vesicles was detected by RESA, and the secretion from rotaxa was detected by SBP1. About 60% of erythroid membrane vesicles were detected by RESA, and about 60% of erythroid membrane vesicles were detected by RESA. These results show that RON3 is important for erythrocyte invasion, RON3N is important for parasite membrane formation after erythrocyte invasion, RON3N is important for parasite membrane transport, RON 3 C is important for parasite membrane formation, RON 3 N is important for parasite membrane transport, RON 3 N is important for parasite membrane formation, RON 3 N is important for parasite membrane transport. Now, the results of this paper are in the process of submission. The original purpose was to establish the identity of the RON3 interacting molecule, but the formation of the complex between RON 3N and RON3C was clearly demonstrated, and the formation of this complex is important for the formation of the colony. Comparison of the immune precipitation products in the presence and absence of TMP with respect to the proximity dependent enzyme AirID and RON3-AirID protozoa The RON3 itself is a compound of molecular weight.

项目成果

期刊论文数量(14)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
赤血球期マラリア原虫におけるRON3タンパク質の機能解析
红系期疟原虫RON3蛋白的功能分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    伊藤 大輔;近藤 陽子;高島 英造;大槻 均
  • 通讯作者:
    大槻 均
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    湯口 貴聡;Bernard Kanoi;長岡 ひかる;三浦 豊和;伊藤 大輔;竹田 浩之;坪井 敬文;高島 英造;大槻 均
  • 通讯作者:
    大槻 均
赤血球期マラリア原虫におけるRON3タンパク質の性状解析
红系阶段疟原虫中 RON3 蛋白的特征
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    伊藤 大輔;大槻 均
  • 通讯作者:
    大槻 均
熱帯熱マラリア原虫生殖母体期の原虫タンパク質輸送におけるSBP1の機能解析
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    面田 彩馨;伊藤 大輔;橘 真由美;吉野 健一;石野 智子;大槻 均;鳥居 本美;入子 英幸
  • 通讯作者:
    入子 英幸
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    大槻 均;金子 修;伊藤 大輔;近藤 陽子;入子 英幸;石野 智子;橘 真由美;坪井 敬文;鳥居 本美
  • 通讯作者:
    鳥居 本美
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  • 发表时间:
    2009
  • 期刊:
  • 影响因子:
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  • 作者:
    Ishii;Kayuza;持田宗周;石井 一也;持田宗周(諒);持田 諒(岐阜女子大学);持平 諒;持田 諒;Daisuke Ito;伊藤大輔;伊藤大輔;伊藤大輔;伊藤 大輔;伊藤 大輔;伊藤大輔;伊藤大輔;伊藤大輔;伊藤大輔;伊藤 大輔;田窪恭治監修・伊藤大輔;田窪恭治;田窪恭治監修伊藤大輔主要作品解説;田窪恭治監修・伊藤大輔;田窪恭治;大高保二郎
  • 通讯作者:
    大高保二郎

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    2022
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    2021
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  • 资助金额:
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  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 2.75万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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  • 批准号:
    19K02819
  • 财政年份:
    2019
  • 资助金额:
    $ 2.75万
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    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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    10J04387
  • 财政年份:
    2010
  • 资助金额:
    $ 2.75万
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    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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    2002
  • 资助金额:
    $ 2.75万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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