赤血球期マラリア原虫の特異的なイオンチャネル形成機構におけるRON3の機能解明

阐明RON3在红系阶段疟原虫特异性离子通道形成机制中的功能

• 批准号: 21K06989
• 负责人: 伊藤 大輔
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06989/
• 关键词: マラリア; 寄生胞膜チャネル; 赤血球膜チャネル; RON3; タンパク質間相互作用; ビオチン化酵素; 熱帯熱マラリア原虫; タンパク質複合体; マラリア原虫; イオンチャネル; ロプトリー

トリメトプリム（TMP）存在下で安定化する大腸菌由来ジヒドロ葉酸還元酵素を基盤とする不安定化ドメイン（DDD）とHAタグをRON3のC末端に付加したRON3-DDD原虫はTMP非存在下で生存できず、輪状体で発育不全を起こす。本研究ではTMP非存在下におけるRON3タンパク質の性状と機能を解析した。RON3は赤血球侵入型原虫で発現してN末断片（RON3N）とC末断片（RON3C）にプロセシングされるが、約60％のプロセシング阻害と約40％の原虫の侵入不全が認められた。侵入後の輪状体ではRON3Cの消失が確認され、時間経過による寄生胞膜チャネル活性の上昇は認められなかった。また赤血球侵入型原虫の分泌小胞から寄生胞に分泌されるRESAは赤血球膜に輸送されたのに対して、輪状体から分泌されるSBP1は約60％が赤血球膜に輸送されず、約60％の赤血球膜チャネル活性の低下が認められた。以上の結果から、RON3のプロセシングは赤血球侵入に重要であり、RON3Nは侵入直後の寄生胞膜チャネル形成、および赤血球膜にタンパク質を輸送するトランスロコン形成、RON3Cは寄生胞膜チャネルの増加に必要となる原虫細胞膜から寄生胞膜へのタンパク質輸送に関与することが示唆された。現在これらの成果について査読付き英文論文を投稿中である。当初の目的であるRON3相互作用分子の同定については、RON3NとRON3Cが複合体を形成することを明らかにし、この複合体形成がチャネル形成に重要であることが示唆された。当初予定していたTMP存在下、および非存在下におけるHAタグを用いた免疫沈降産物の比較ができないため、代替案として近位依存性ビオチン化酵素AirID をRON3のC末端に付加したRON3-AirID原虫を作出した。これまでにRON3自身がビオチン化されたと考えられる分子量以外に複数のシグナルを検出している。

Stabilized Escherichia coli in the presence of TMP HAタグをRON3's C-terminus is added and RON3-DDD protozoa cannot survive in the absence of TMP, and the whorls and rotary bodies cannot survive. This study was conducted to analyze the properties and functions of RON3 RON3 in the absence of TMP. RON3 is a type of erythroblast-invasive protozoa that appears in N-terminal fragments (RON3N) and C-terminal fragments (RON3C).ロセシングされるが, about 60% of the のプロセシング barrier, and about 40% of the protozoa, のincomplete invasion, められた. After the invasion, the disappearance of the wheel-shaped body and the confirmation of the disappearance of RON3C, and the increase of the activity of the parasitic cell membrane as time passes are confirmed.またErythroblast-invasive protozoa のsecretory cell からparasitic cell にsecretion されるRESA はerythroblast membrane にtransport されたのに対して、wheel body かSBP1 secretes about 60% of the erythrocyte membrane and transports it, and about 60% of the erythrocyte membrane activity is reduced. The above result is important, RON3's red blood cell invasion is important, RO After N3N invades, the parasitic cell membrane is formed, and the red blood cell membrane is transformed and the quality is lost. Send するトランスロコン formation, RON3C parasitic cell membrane チャネルのincrease necessary となThe protozoal cell membrane and the parasitic cell membrane are used to transport the parasite and the parasite is transmitted through the parasite cell membrane. The results of the research are currently being reviewed and published in English. The paper is currently being submitted. The original purpose was the complex of RON3 interacting molecules, RON3N and RON3C.することを明らかにし, この Complex Formation がチャネル Formation にimportant であることが Show唆された. It was originally planned to use いたimmunoprecipitation in the presence of TMP and in the absence of におけHAタグをComparison of reduced products, ができないため, replacement case, として proximal dependence, ビオチン enzyme AirID RON3's C-terminal is added and RON3-AirID protozoa is made.これまでにRON3 itself is a がビオチン化されたと卡えられる molecular weight other than the plural のシグナルを検出している.

项目成果

赤血球期マラリア原虫におけるRON3タンパク質の機能解析

红系期疟原虫RON3蛋白的功能分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 伊藤 大輔;近藤 陽子;高島 英造;大槻 均
• 通讯作者: 大槻 均

Plasmodium yoeliiのerythrocyte binding like タンパク質はマウス赤血球表面タンパク質Basiginと相互作用する

约氏疟原虫的红细胞结合样蛋白与小鼠红细胞表面蛋白 Basigin 相互作用

• 发表时间: 2023
• 作者: 湯口 貴聡;Bernard Kanoi;長岡 ひかる;三浦 豊和;伊藤 大輔;竹田 浩之;坪井 敬文;高島 英造;大槻 均
• 通讯作者: 大槻 均

赤血球期マラリア原虫におけるRON3タンパク質の性状解析

红系阶段疟原虫中 RON3 蛋白的特征

• 发表时间: 2022
• 作者: 伊藤 大輔;大槻 均
• 通讯作者: 大槻 均

熱帯熱マラリア原虫生殖母体期の原虫タンパク質輸送におけるSBP1の機能解析

SBP1在恶性疟原虫配子体阶段寄生虫蛋白运输中的功能分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 面田 彩馨;伊藤 大輔;橘 真由美;吉野 健一;石野 智子;大槻 均;鳥居 本美;入子 英幸
• 通讯作者: 入子 英幸

ネズミマラリア原虫 Plasmodium yoelii EBL 領域６における感染性についての解析

小鼠疟疾寄生虫约氏疟原虫 EBL 区 6 的感染性分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 大槻 均;金子 修;伊藤 大輔;近藤 陽子;入子 英幸;石野 智子;橘 真由美;坪井 敬文;鳥居 本美
• 通讯作者: 鳥居 本美