ニューロモデュレーションはαシヌクレイン脳内伝播に影響を及ぼすのか？

前年度と同様にパーキンソン病おける中枢神経内のαシヌクレイン（αsyn)伝播に対する、ニューロモデュレーションの影響の有無を確認するために、αsyn伝播モデル動物に対して、視床下核（STN）破壊術を施行したC57BL/6マウスを作製した。前年度は片側線条体にα-syn preformed fibrils (PFF) を定位的に注入（2mg/ml, 2.5 micro L）前に同側視床下核（STN）をイボテン酸（0.01 mg/ml, 2 micro L）で破壊しαsynの広がりを観察し、コントロール群（STNに生理食塩水注入群）と比較してαsynの皮質、黒質への広がりが抑制されていることを観察した(両群ともn=3)が、本年度はより実臨床に近い、αsyn PFFを片側線条体に注入24時間後にSTNをイボテン酸を用いて破壊し、解剖学的にαsynの伝播する領域を連続切片で確認した(n=3)。パラフィン切片を作成後、抗リン酸化シヌクレイン抗体(pSyn#64)を用いて免疫組織学的染色を行い、α-synの広がりを連続切片を用いてKeyence-Bz800のハイブリットセルカウントで定量的に計測を行った。その結果、コントロール群と比較してSTN破壊群において、αsynの皮質及び黒質への発現量の減少を認めた(p<0.0001)。これらの結果は、実臨床病態下でもSTNニューロデュレーションにおける、αsyn伝播の抑制可能性を示唆するものであった。現在、αsyn注入前後で、PDにおけるニューロモデュレーションのもう一つのターゲットとなる淡蒼球内節（GPi,げっ歯類ではEntopeduncular nucleus) を破壊しαsynの広がりの観察を行っている。

前年度と同様にパーキンソン病おける中枢神経内のαシヌクレイン（αsyn)伝播に対する、ニューロモデュレーションの影響の有無を確認するために、αsyn伝播モデル動物に対して、視床下核（STN）破壊術を施行したC57BL/6マウスを作製した。前年度は片側線条体にα-syn preformed fibrils (PFF) を定位的に注入（2mg/ml, 2.5 micro L）前に同側視床下核（STN）をイボテン酸（0.01 mg/ml, 2 micro L）で破壊しαsynの広がりを観察し、コントロール群（STNに生理食塩水注入群）と比較してαsynの皮質、黒質への広がりが抑制されていることを観察した(両群ともn=3)が、本年度はより実臨床に近い、αsyn PFFを片側線条体に注入24時間後にSTNをイボテン酸を用いて破壊し、解剖学的にαsynの伝播する領域を連続切片で確認した(n=3)。パラフィン切片を作成後、抗リン酸化シヌクレイン抗体(pSyn#64)を用いて免疫組織学的染色を行い、α-synの広がりを連続切片を用いてKeyence-Bz800のハイブリットセルカウントで定量的に計測を行った。その結果、コントロール群と比較してSTN破壊群において、αsynの皮質及び黒質への発現量の減少を認めた(p<0.0001)。これらの結果は、実臨床病態下でもSTNニューロデュレーションにおける、αsyn伝播の抑制可能性を示唆するものであった。現在、αsyn注入前後で、PDにおけるニューロモデュレーションのもう一つのターゲットとなる淡蒼球内節（GPi,げっ歯類ではEntopeduncular nucleus) を破壊しαsynの広がりの観察を行っている。