ケロイド発症における間葉系幹細胞の役割の解明と新規治療法開発

阐明间充质干细胞在疤痕疙瘩发生和开发新疗法中的作用

• 批准号: 21K08357
• 负责人: 長谷川 敏男
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08357/
• 关键词: 脂肪組織由来幹細胞; ケロイド; 線維芽細胞; TGF-β; 線維化; 間葉系幹細胞; 筋線維芽細胞

ケロイドは、主に筋線維芽細胞によってコラーゲンを中心とした細胞外基質が過剰に産生されて組織に沈着した結果、皮膚の硬化や醜状変形、掻痒や疼痛、拘縮による機能障害を生じる線維化疾患である。transforming growth factor-β1（TGF-β1）は細胞外基質の産生と線維化を促進するサイトカインであり、創傷治癒やケロイドの発生に深く関与している。一方、皮下脂肪織内に存在する間葉系幹細胞である脂肪組織由来幹細胞は、筋線維芽細胞となって創傷治癒に寄与するだけでなく、免疫調整作用を有し、様々な機序で創傷治癒や線維化を制御している。脂肪組織由来幹細胞がケロイドの発症に関与しているかどうかを検討するにあたって、脂肪組織由来幹細胞がケロイド由来線維芽細胞の線維化細胞を拮抗するかどうかを調査した。方法は、TGF-β1で刺激したケロイド線維芽細胞を脂肪組織由来幹細胞と共培養した後に蛍光免疫染色、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応、ウェスタンブロット法によりsmooth muscle protein 22-α、I型コラーゲン、TGF-β1、matrix metallopeptidase 2、SMAD2、SMAD3、platelet-derived growth factor receptor α、TGF-β receptor type-1の発現を検討し、ケロイド線維芽細胞を包埋培養したコラーゲンゲル収縮試験も実施した。その結果、ケロイド線維芽細胞はこれらの全てを発現しており、TGF-β1はこれらの発現を促進したが、脂肪組織由来幹細胞との共培養の結果、これらの発現は抑制された。また、TGF-β1はケロイド由来線維芽細胞を包埋培養したコラーゲンゲルの収縮を促進したが、脂肪組織由来幹細胞との共培養によってそれらは抑制された。以上の結果より、脂肪組織由来幹細胞はケロイド由来線維芽細胞の線維芽細胞の線維化反応を拮抗することが示された。脂肪組織由来幹細胞がケロイドの発生を抑制している可能性、ケロイド好発部位に脂肪組織由来幹細胞が少ない可能性も考えられる。

Keloid是纤维化疾病，会导致细胞外基质（主要是胶原蛋白）通过肌纤维细胞沉积在组织中，导致皮肤僵硬，畸形，瘙痒，疼痛和功能障碍，从而导致皮肤僵硬。转化生长因子-β1（TGF-β1）是一种细胞因子，可促进细胞外基质产生和纤维化，并且与伤口愈合和乳突发育深度涉及。另一方面，脂肪组织衍生的干细胞，它们是皮下脂肪组织中发现的间充质干细胞，成为肌纤维细胞，并有助于伤口愈合，但也具有免疫调节作用，并通过各种机制控制伤口愈合和纤维化。在检查脂肪组织衍生的干细胞是否参与乳突的发展时，我们研究了脂肪组织衍生的干细胞是否拮抗了乳突衍生的成纤维细胞的纤维化细胞。该方法是通过与脂肪组织衍生的干细胞共培养，检验平滑肌蛋白22-α，I型胶原蛋白，TGF-β1刺激的乳头状成纤维细胞和TGF-β受体类型-1的表达，然后通过荧光免疫抑制，实时聚合酶链反应和平滑肌肉的表达，并在效率上培养脂肪组织的干细胞表达，并通过荧光免疫素抑制剂进行了荧光免疫蛋白，并研究了平滑的表达，并研究了肌肉的表达。 TGF-β1，基质金属肽酶2，SMAD2，SMAD3，血小板衍生的生长因子受体α和TGF-β受体Type-1，并进行了胶原蛋白凝胶收缩试验，其中培养了核苷成纤维细胞。结果，酮成纤维细胞表达了所有这些，TGF-β1促进了它们的表达，但与脂肪组织衍生的干细胞共培养抑制了其表达。此外，TGF-β1促进了嵌入酮衍生的成纤维细胞中的胶原蛋白凝胶的收缩，但通过与脂肪组织衍生的干细胞共培养来抑制它们。以上结果表明，脂肪组织衍生的干细胞拮抗了丝eloid衍生的成纤维细胞的纤维化反应。脂肪组织衍生的干细胞也可能抑制酮类的发育，并且脂肪组织衍生的干细胞可能不太可能在有希望的乳子状体的部位发现。