急性骨髄性白血病に対するCAR-T療法の開発

インテグリンα４は白血病細胞と正常血球細胞の両方に発現していると考えられている細胞表面分子であるが、細胞の状態によりその高次構造を変化させることが知られている。我々はこれまでの白血病細胞に対する研究において多数のモノクローナル抗体クローンを作製しており、その中からインテグリンα４の立体構造が活性化状態のときに、より強い結合能をもつ抗体（抗体Ｘ）を見出した。抗体Ｘを産生するハイブリドーマを増殖し充分量の凍結ストックを作成すると同時に、無血清状態で培養することにより高純度のモノクローナル抗体を充分量作製・精製した。ELISAによるモノクローナル抗体サブタイプ解析により抗体ＸのサブタイプがIgG1であることを同定した。抗体Ｘは複数の病型の白血病細胞株に対して結合能を示し、また複数の病型の白血病患者由来の白血病細胞に対しても結合能を示した。カルシウム濃度とマグネシウム濃度を調整することでインテグリンの立体構造が変化することが知られているため、インテグリンα4の活性化状態と抗体Xとの結合能の強さに変化があるか調べたところ、複数の白血病細胞株においてインテグリンα４が活性化状態にあるときにより強い結合能を示すことがわかった。現在白血病患者由来の白血病細胞に対して同様にインテグリンα4の活性化状態と抗体Ｘの結合能の強さについての解析を行っている。同時に既存の抗インテグリンα４抗体との結合性の違いを解析している。

インテグリンα４は白血病細胞と正常血球細胞の両方に発現していると考えられている細胞表面分子であるが、細胞の状態によりその高次構造を変化させることが知られている。我々はこれまでの白血病細胞に対する研究において多数のモノクローナル抗体クローンを作製しており、その中からインテグリンα４の立体構造が活性化状態のときに、より強い結合能をもつ抗体（抗体Ｘ）を見出した。抗体Ｘを産生するハイブリドーマを増殖し充分量の凍結ストックを作成すると同時に、無血清状態で培養することにより高純度のモノクローナル抗体を充分量作製・精製した。ELISAによるモノクローナル抗体サブタイプ解析により抗体ＸのサブタイプがIgG1であることを同定した。抗体Ｘは複数の病型の白血病細胞株に対して結合能を示し、また複数の病型の白血病患者由来の白血病細胞に対しても結合能を示した。カルシウム濃度とマグネシウム濃度を調整することでインテグリンの立体構造が変化することが知られているため、インテグリンα4の活性化状態と抗体Xとの結合能の強さに変化があるか調べたところ、複数の白血病細胞株においてインテグリンα４が活性化状態にあるときにより強い結合能を示すことがわかった。現在白血病患者由来の白血病細胞に対して同様にインテグリンα4の活性化状態と抗体Ｘの結合能の強さについての解析を行っている。同時に既存の抗インテグリンα４抗体との結合性の違いを解析している。