Biomarker-based manufacture of MAGE-A4/CAR-T cell in immunotherapy for esophageal cancer

基于生物标记的 MAGE-A4/CAR-T 细胞制造用于食管癌免疫治疗

• 批准号: 21K08682
• 负责人: 影山 愼一
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08682/
• 关键词: 食道癌; CAR-T療法; がん免疫療法; バイオマーカー

本研究は、食道癌の約50%に発現するMAGE-A4抗原を標的とするCAR-T療法の開発のために、既に臨床試験で細胞輸注されたTCR遺伝子導入T細胞の形質解析、遺伝子発現、代謝物質の網羅的解析を行い、臨床試験の情報（有害事象、臨床効果、等）に関連するバイオマーカーの抽出を行うものである。NY-ESO-1/TCR-T細胞輸注を実施し同意のもとで保管されている臨床検体を使用し、サイトカイン放出症候群（CRS）、臨床反応と製造TCR-T細胞、輸注後の末梢血TCR-T細胞の免疫細胞学的解析を行った。Mass cytometryと36種のメタルタグ抗体のパネルを用い、輸注後の患者検体におけるTCR-T製品とその末梢血検体の解析の結果、すべての製造TCR-T細胞の不均一なT細胞マーカー発現が観察された。CRS発症検体のT細胞ではCD244とCD39の顕著な発現があり、一方、CRS発症のない症例のT細胞では、両マーカーの発現が低発現であった。高次元データを可視化するためUMAP（Uniform Manifold Approximation and Projection）を用いると、CRSの製造TCR-T細胞中のNY-ESO-1特異的T細胞の表現型は、2つの細胞クラスターにおいて主にCD244、CD39、CD45RAの発現上昇とCCR7の欠如によりの特徴づけされていた。MAGE-A4/CAR-T細胞細胞の作製については、遺伝子導入に用いる新規ベクターを選定した。これはGITR細胞内ドメイン遺伝子を活性化シグナルとするCAR遺伝子導入用レトロウイルスである。ヒトT細胞に遺伝子導入し、免疫不全NOGマウスでのin vivo担癌モデルにおいて腫瘍増殖抑制を示していた。

This study is related to the development of CAR-T therapy targeting MAGE-A4 antigen in approximately 50% of esophageal cancer, cell infusion in clinical trials, characterization of TCR gene introduced into T cells, gene production, analysis of metabolite traps, and information from clinical trials (harmful events, clinical effects, etc.). NY-ESO-1/TCR-T cell infusion, consent, storage, clinical use, CRS, clinical response, production of TCR-T cells, immunocytological analysis of TCR-T cells in peripheral blood after infusion. Mass cytometry and the use of 36 different types of TCR-T antibodies, the analysis of TCR-T products and peripheral blood samples after infusion, and the observation of heterogeneous T cell development in the production of TCR-T cells. T cells in CRS development model show low levels of CD244 and CD39 expression. UMAP (Uniform Manifold Approximation and Projection) is used to visualize the expression of NY-ESO-1-specific T cells in CRS production TCR-T cells. The expression of CD244, CD39, CD45RA and CCR7 are not detected. MAGE-A4/CAR-T cell production process, gene introduction process, new rules, selection process This is the first time that GITR has been used to activate CAR gene. T cell gene transfer, immune deficiency NOG gene transfer in vivo, tumor cell proliferation inhibition

项目成果

Prognostic significance of NY-ESO-1 antigen and PIGR expression in esophageal tumors of CHP-NY-ESO-1-vaccinated patients as adjuvant therapy.

NY-ESO-1 抗原和 PIGR 表达在 CHP-NY-ESO-1 疫苗接种患者的食管肿瘤中作为辅助治疗的预后意义。

• DOI: 10.1007/s00262-022-03194-5
• 发表时间: 2022
• 期刊: Cancer immunology, immunotherapy : CII
• 作者: Yasuhiro Nagata;Shinichi Kageyama;Takeshi Ishikawa;Satoshi Kokura;Tetsuya Okayama;Tetsuya Abe,...Hiroshi Shiku
• 通讯作者: Tetsuya Abe,...Hiroshi Shiku