スキルス胃癌の微小環境構築・腹膜播種を阻止するためのレクチン含有細胞外小胞の開発

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本研究は、高転移性胃癌細胞が分泌する細胞外小胞の性状および機能解析を行い、腹膜中皮細胞を標的化する際にガレクチン-4が関与するかを明らかにすることを目的とする。また、ガレクチン-4発現細胞とKO細胞が分泌する細胞外小胞を比較することで、腹膜転移を促進させるメカニズムの解明を目指す。当該年度は、まず各NUGC4細胞クローン株(wild株, Mock株, KO株, Rescue株2種)の細胞外小胞の精製しWestern Blottingによる特性解析を行った。各細胞外小胞の重要タンパク分子の発現について調べたところ、いずれもCell Lysatesにおける発現パターンとほとんど変わらないことが分かった。一方、各細胞外小胞上の糖脂質についても解析を進めた結果、各細胞株における糖脂質発現パターンと同様に、腹膜播種を起こすwild株パターンと腹膜播種を起こさないKO株パターンに大別できることが明らかになった。各細胞株由来の糖脂質はそのまま細胞外小胞の膜を形成し、受容細胞に取り込まれた後にもリサイクルされ受容細胞の膜の一部になる可能性が高いことから、癌の悪性化を伝承する可能性も考えられた。次に細胞外小胞に含まれるマイクロRNA (miRNA)に着目し、受託解析によりNUGC4細胞の腹膜転移に関連するmiRNAの有無を調べることにした。NUGC4 cells由来エクソソームが癌微小環境構築にどのように関与するのかを解明する手がかりが得られると考えられた。miRNA解析の結果からは細胞外小胞の癌悪性化への関与が示唆された。しかしながら、血管内皮細胞や腹膜中皮細胞を用いた評価では、顕著な微小環境構築はまだ確認できていないのが現状である。今後の展開として、これまでに顕著な変化が見られている細胞膜上糖脂質とガレクチン-4の働きに着目して、腹膜播種を促進させるメカニズム解明を目指す。