Etablierung und Durchführung genetischer Selektionsstrategie zur Identifizierung und Charakterisierung von Komponenten des Sec-abhängigen Proteintransports in Archaeen

建立和实施遗传选择策略来识别和表征古细菌中 Sec 依赖性蛋白质运输的组成部分

• 批准号: 29898263
• 负责人: Dr. Stefanie Storf
• 金额: --
• 依托单位: Leidy Laboratories of Biology
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/29898263?language=en
• 关键词: Etablierung; und; Durchf; hrung; genetischer

Der Transport von Proteinen über hydrophobe Membranen ist ein für alle Zellen lebenswichtiger Prozess. Die meisten ungefalteten Proteine werden über das in allen Organismenreichen vorkommende Sec-System transportiert, das aus einer konservierten Membranpore und nicht konservierten akzessorischen Untereinheiten besteht. In Archaeen besteht der Sec-Apparat interessanterweise aus Homologen bakterieller und eukaryotischer Proteine. Eine Translokations-ATPase, wie für Bakterien und Hefe beschrieben, wurde bisher aber noch nicht entdeckt. Damit stellt sich die Frage wie der Proteintransport mit einer Mischung von bakteriellen und eukaryotischen Komponenten funktioniert und wie er energetisch bewerkstelligt wird. Das Ziel des vorliegenden Antrags ist es mit Hilfe genetischer Selektionsstrategien Komponenten des Sec-Apparats des Haloarchaeen Haloferax volcanii zu isolieren und im Anschluss potentielle Translokationsmutanten zu charakterisieren. Mit den dargestellten Strategien können Mutationen in schon bekannten Sec-Komponenten identifiziert werden, die mit der kürzlich veröffentlichten Kristallstruktur verglichen werden können und hervorragende Mutanten für Struktur-Funktionsuntersuchungen darstellen. Hauptsächlich hat diese Strategie aber das Potential neue Sec-Komponenten zu identifizieren: zum einen archaeenspezifische Komponenten ohne Homologe in Bakterien oder Eukaryoten, zum anderen Komponenten mit bakteriellen oder eukaryotischen Homologen, denen bisher aber noch keine Funktion im Proteintransport zugeschrieben wurde. Durch letzteres würden damit nicht nur neue Kenntnisse über den Proteintransport in Archaeen, sondern in allen Organismenreichen gewonnen.

Der Transport von Proteinen über hydrophobe Membranen ist ein für alle Zellen lebenswichtiger Prozess.大多数的蛋白质韦尔登在艾伦组织中都是通过辅助系统转运的，它们来自一个保守的膜孔，而不是保守的非保守的。这是同源蛋白质和真核生物蛋白质的第二种感兴趣的仪器。一个翻译-ATP酶，就像Bakterien和Hefe beschrieben，wurde bisher aber noch nocht deckt。但这一点与蛋白质转运有关，它包含一个由细菌和真核生物组成的功能性的错误，并且能量消耗很大。这座火山前坑是由Haloferax volcanii的第二代海洋古生物设备的遗传选择策略组成的，具有孤立和潜在的迁移特性。通过分析第二组分中的突变，可以确定Kristallstruktur verglichen können和hervorragende Mutanten für Struktur-Funktionsuchungen darstellen。Hauptsächlich认为，这是一个潜在的新的次级组分的鉴定：在Bakterien或Eukaryoten的同源物中，一个古细菌特异性的组分，以及与Bakteriellen或Eukaryotischen同源物的组分，但在蛋白质转运过程中没有任何功能。Dalletzteres würden damit努尔neue Kenntnisse über den Proteintransport in Eschereen，sondern in艾伦Organismenreichen gewonnen.