Elucidation of the multi-step carcinogenesis mechanism in Xp11.2 translocation renal cell carcinoma

Xp11.2転座腎細胞癌は、転座によりX染色体上の転写因子TFE3 が融合遺伝子を形成し、恒常活性型の転写因子として機能することで生じる腎細胞癌である。我々は腎臓特異的融合TFE3(PRCCTFE3)発現マウスを作製することで、融合TFE3が腎細胞癌を発生させる事を世界に先駆けて明らかにした。一方で融合TFE3は、ヒト腎臓近位尿細管由来のHK2細胞やヒト胎児腎由来HEK293細胞に発現誘導させると細胞増殖を抑制する。個体においてがん遺伝子として働く融合TFE3が、どのようにこの細胞増殖抑制を乗り越えて発がんを惹き起こすのか、そのメカニズムは不明である。そこで本研究ではCRISPR/Cas9システムによるゲノムワイドスクリーニングを行い、融合TFE3による細胞増殖抑制の迂回に必要な遺伝子変化を同定する事で、Xp11.2転座腎細胞癌の発がん機構を解明する事を目標に研究を推進している。令和4年度はCRISPR/Cas9を安定的に発現するPRCC-TFE3発現誘導可能なHK2細胞を用いたゲノムワイドスクリーニングを行い、融合遺伝子TFE3発現後の細胞増殖を抑制する候補遺伝子としてCCNCを同定した。CCNCはmediator complexの構成因子であり、同様にmediator complexの構成要素であるCDK8/19の特異的阻害剤を用いても融合遺伝子TFE3発現後の細胞抑制を回避することを確認した。以上からmediator complexは転写因子TFE3が転座により恒常活性型となった後の特異的な転写制御に関与していると考えられる。

Xp11.2転座腎細胞癌は、転座によりX染色体上の転写因子TFE3 が融合遺伝子を形成し、恒常活性型の転写因子として機能することで生じる腎細胞癌である。我々は腎臓特異的融合TFE3(PRCCTFE3)発現マウスを作製することで、融合TFE3が腎細胞癌を発生させる事を世界に先駆けて明らかにした。一方で融合TFE3は、ヒト腎臓近位尿細管由来のHK2細胞やヒト胎児腎由来HEK293細胞に発現誘導させると細胞増殖を抑制する。個体においてがん遺伝子として働く融合TFE3が、どのようにこの細胞増殖抑制を乗り越えて発がんを惹き起こすのか、そのメカニズムは不明である。そこで本研究ではCRISPR/Cas9システムによるゲノムワイドスクリーニングを行い、融合TFE3による細胞増殖抑制の迂回に必要な遺伝子変化を同定する事で、Xp11.2転座腎細胞癌の発がん機構を解明する事を目標に研究を推進している。令和4年度はCRISPR/Cas9を安定的に発現するPRCC-TFE3発現誘導可能なHK2細胞を用いたゲノムワイドスクリーニングを行い、融合遺伝子TFE3発現後の細胞増殖を抑制する候補遺伝子としてCCNCを同定した。CCNCはmediator complexの構成因子であり、同様にmediator complexの構成要素であるCDK8/19の特異的阻害剤を用いても融合遺伝子TFE3発現後の細胞抑制を回避することを確認した。以上からmediator complexは転写因子TFE3が転座により恒常活性型となった後の特異的な転写制御に関与していると考えられる。