子宮体癌細胞の上皮間葉移行を介した浸潤能に関わる代謝調節機構の解明

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我々は癌抑制転写因子BHLHE40が癌細胞の栄養代謝に与える影響を見るため、まず代表的なエネルギーセンサーであるAMPKの発現とリン酸化に与える影響を調べてきた。これまでの研究でBHLHE40が子宮体癌細胞においてAMPKα1 /2Thr172のリン酸化を促進すること、解糖系を抑制しミトコンドリア呼吸を促進することを見出した。またその過程に乳酸水酸化酵素（LDHA）の活性的リン酸化（p-Tyr10）の抑制によるLDHA活性の抑制とピルビン酸水酸化酵素（PDHα1）の抑制的リン酸化（p-Ser293）の抑制による、PDH活性の促進が関わることを見出した。BHLHE40がAMPKα1/2のThr172リン酸化を促進する機序として、AMPKα1を脱リン酸化すると考えられる酵素PPM1AとPPM1Fを同定した。実際BHLHE40は転写抑制によりこれらの脱リン酸化酵素の発現を抑制することを発現解析、レポーター解析、ゲルシフト解析で明らかとした。また、PPM1A, PPM1Fの不活性型変異体を作成し、これらの酵素が確かにAMPKα1/2を脱リン酸化することを細胞内での解析と共にin vitroでの脱リン酸化解析でも明らかにした。PPM1A, PPM1FのノックダウンによりAMPKα1 /2Thr172のリン酸化が増加した。またBHLHE40をノックダウンした子宮体癌細胞株を作成し、マイクロアレイ解析, GSEA解析によりBHLHE40が制御する栄養代謝経路を網羅的に明らかとした。