权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

胎盤形成を制御し、癌抑制機能をもつ新規遺伝子NECC1の解析

NECC1的分析，一种控制胎盘形成并具有癌症抑制功能的新基因

基本信息

批准号：
17791124
负责人：
浅野間和夫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

正常マウス胎盤におけるNECC1の発現は胎齢8.0-9.5日にかけ海綿状栄養膜細胞層(SPT)と栄養膜巨細胞層(TGC)に限局して発現しており、NECC1欠損変異マウスの解析では胎齢9.5日よりコントロールと比べてTGCの過形成とSPTの低形成を認めた。栄養膜幹細胞をCdx2の発現で検討したところ変異マウスでは発現細胞が著明に減少していた。In-vitroでの機能解析のため分化モデルとしてRcho-1細胞、マウス栄養膜幹細胞株(TS細胞株)を用いた。TSに分化刺激を与えると、巨細胞への分化に伴いNECC1の発現を認めた。NECC1発現アデノウィルスベクターを作製し、Rcho-1細胞、TS細胞株に遺伝子導入し、分化刺激を与えたところ分化に対し抵抗性を示した。この結果は細胞の形態、DNA量の半定量、分化マーカー発現の検討により導かれた。また、NECC1の下流に位置する分子であるSRF(serum response factor)との関連を探るため、SRF結合部位を用いたレポーター活性を測定したところRcho-1細胞の分化に伴い活性が上がり、NECC1や優性ネガティブ型SRF(DN-SRF)の共導入により抑制された。SRFはNECC1と同様、SPTとTGCで発現しており、免疫沈降法により両者の関連性が示唆された。TGCの特異的分泌ホルモンであるPl1の転写制御領域を用いたレポーターアッセイを行ったところ分化刺激に伴い上昇する活性が野生型SRF(wt-SRF)の共導入により促進され、NECC1、DN-SRFの共導入により抑制された。Wt-SRF、DN-SRFをTSに導入し、導入細胞を発現ベクターについたタグにより同定、形態を観察したところ、wt-SRF導入細胞は分化刺激を与えなくても巨細胞への分化を示し、DN-SRF導入細胞は逆に分化を抑制する結果で会った。以上から、NECC1はSRFを介する栄養膜細胞の分化シグナルにネガティブフィードバックを与え、栄養膜細胞の分化を調整する機能を有すると示唆された。

From 8.0 to 9.5 days after the birth of a normal fetus, the NECC1 of the normal fetus showed that the sea like cells (SPT) and the giant membrane cells (TGC) of the normal fetuses were significantly lower than that of the SPT cells (SPT) of the normal fetuses. This is the first time that there is a difference in the number of Cdx2 cells in the membrane. In-vitro could be used to analyze the differentiation of Rcho-1 cells and membrane cell strains (TS cells). The differentiation stimulation of TS and the differentiation of giant cells were accompanied by the recognition of NECC1. NECC1 showed that the cells of Rcho-1 cell, TS cell line and TS cell line were differentiated, stimulated and differentiated, and resistance was demonstrated. The results showed that the shape of cells, the quantity of DNA was semi-quantitative, and the differentiation was abnormal. The molecular markers of SRF (serum response factor) and SRF (DN-SRF) were detected, and the SRF binding site was used to determine the cell differentiation of Rcho-1 cells with high activity and high activity. SRF's NECC1 was the same, SPT's TGC was found to be abnormal, and immunoprecipitation was used to determine the connection between the two. In the field of TGC, the secretion of wild-type SRF (wt-SRF), NECC1 and DN-SRF are used to promote the induction of differentiation and stimulation of differentiation in the field. Wt-SRF, DN-SRF, TS, DN-SRF, DN-SRF, reverse differentiation, inhibition of cell differentiation, inhibition of cell differentiation, inhibition. The above, NECC1, SRF, cell differentiation, cell differentiation, membrane cell differentiation, membrane cell differentiation