絨毛癌抑制遺伝子の単離

绒毛膜癌抑制基因的分离

• 批准号: 01J10344
• 负责人: 浅野間 和夫
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J10344/
• 关键词: 絨毛癌; 癌抑制遺伝子; 胎盤分化; ホメオドメイン; 栄養膜巨細胞; 海綿状栄養膜細胞; in situ hybridization; 栄養合胞体細胞; 細胞分化; インプリンティング; メチル化

1.我々がヒト絨毛cDNAライブラリーから単離したホメオドメインを有する癌抑制候補遺伝子NECC1についてさらに解析を進めた。2.アメリカテキサス大学のサウス・ウェスタンメディカルセンターの分子生物学教室との共同研究によりNECC1ノックアウトマウスの胎盤の解析を行った。野生型マウスにおいてNECC1は胎齢8.0日より栄養膜巨細胞層に発現を認め、9.5日まで発現するものの10.5日では発現が消失していた。In situ hybridizationにより胎盤の各構造を解析したところNECC1変異型マウスにおいて胎齢9.5日より海綿状栄養膜細胞層と合胞体迷路層の発育不良と合胞体巨細胞層の過形成を認めた。この傾向は胎齢11.5日にかけ著明になった。栄養膜幹細胞のマーカーを用いて解析したところ変異体においては栄養膜幹細胞が減少していることか分かった。このことからNECC1は栄養膜幹細胞から海綿状栄養膜細胞への分化を促進し、栄養膜巨細胞への分化を抑制する働きをもつことが示唆される。現在、栄養膜幹細胞の性質をもつラットの細胞(Rcho-1)をもちいてNECC1が栄養膜巨細胞への分化を抑制するのか解析中である。3.ヒト絨毛癌細胞株Bewoにadenylate cyclase賦活剤であるフォルスコリンを添加し分化を誘導したところNECC1の発現がRNAレベル、蛋白レベルともに上昇することを確認した。また、ルシフェラーゼ・アッセイをもちいてNECC1の転写調節領域を同定した。この領域はマウスにおける転写調節領域と同様、転写因子であるNKXファミリーに反応して活性化されることが分かった。特にNKX3-1は栄養膜細胞の分化に際して発現が上昇し、またNECC1が転写複合体をつくるSRF(serum response factor)とも結合することを免疫沈降法により見い出した。現在は栄養膜細胞の分化にNKX3-1とNECC1、SRFがどのように関わるかをさらに解析している。4.ヒトNECC1を強発現させることのできるアデノウィルスを作製した。

1. We are looking forward to the analysis of NECC1, a candidate for cancer suppression. 2. Molecular biology classroom of the university and joint research of NECC The wild-type NECC1 cells were found at 8.0 days, 9.5 days, and 10.5 days. In situ hybridization analysis of placental structures, NECC1 heteromorphic, fetal 9.5 days old, spongy trophoblast layer, syncytial labyrinth layer, dysgenesis, syncytial giant cell layer formation. The trend is 11.5 days. The number of stem cells in the cell population decreased. NECC1 promotes differentiation of cultured membranous stem cells from spongy membranous stem cells and inhibits differentiation of cultured membranous giant cells. Now, the nature of cultured membranous stem cells (Rcho-1) has been analyzed in order to inhibit the differentiation of cultured membranous giant cells (NECC-1). 3. The expression of adenylate cyclase in human choriocarcinoma cell line Bewo was confirmed by the induction and differentiation of adenylate cyclase. NECC1's write adjustment field is fixed. This domain is not only active but also reactive. In particular, NKX3 -1 is found to increase during differentiation of cultured membrane cells, and NECC1 is found to increase during immunoprecipitation. Now, NKX3 -1, NECC1 and SRF are involved in the differentiation of cultured membrane cells. 4. NECC1 is a powerful tool to control the flow of energy.

项目成果

Zhou Y et al.: "Identification of FOXC1 as a TGF-β1 responsive gene and its involvement in negative regulation of cell growth"Genomics. 80,5. 465-472 (2002)

Zhou Y等人：“FOXC1作为TGF-β1响应基因的鉴定及其参与细胞生长的负调节”Genomics 80,5 (2002)。

浅野間和夫: "癌遺伝子治療への臨床応用:産婦人科の実際"金原出版. 122 (2002)

Kazuo Asanoma：“癌症基因治疗的临床应用：妇产科实践”Kanehara Publishing 122（2002）。

Kazuo Asanoma et al.: "Analysis of a candidate gene which is associated with growth suppression of choriocarcinoma and differentiation of trophoblasts."Journal of Reproductive Medicine. (in press). (2004)

Kazuo Asanoma 等人：“与绒毛膜癌生长抑制和滋养层细胞分化相关的候选基因的分析。”生殖医学杂志。

Asanoma K. et al.: "NECC1, a candidate choriocarcinoma suppressor gene which encodes homeodomain consensus motif"Genomics. (In press). (2003)

Asanoma K. 等人：“NECC1，一种候选绒毛膜癌抑制基因，编码同源结构域共有基序”基因组学。