体外潅流法を用いた遊離皮弁モデルと無細胞真皮マトリックスを用いた人工脂肪弁の開発

前年度に引き続いて実験を行った。まず脂肪由来間葉系幹細胞を無細胞真皮マトリックス（ADM）に播種した組織の状態を電子顕微鏡を用いて評価した。走査型（SEM）は故障していたため、透過型（TEM）で撮影した。光学顕微鏡上での所見と同様に、真皮側に細胞の接着を認めるものの、表皮側への接着は乏しく、ADM表皮側と真皮側で生着の所見が異なることが分かった。以上、ADMをscaffoldとした脂肪由来間葉系幹細胞の播種、培養は可能であることが分かった。また３次元プリンター（システムクリエイト社製 Bellulo400）が使用できる環境が整ったため、本機を研究に取り入れて立体的な人工皮弁を作成する試みも行った。具体的には生体吸収性かつ3次元プリンターで出力が可能な素材でscaffoldを作成して、ここにADMを播種して生体内に埋入し、血管柄を付加してprefabricated flapと移植することを想定した。前述の条件を満たす素材としてPolycaprolactone（Facilan TM PCL 100 Filament、3D4Makers、Netherlands）を輸入し、３次元プリンターを用いて造形を行った。通常PLAに用いている3次元プリンターの出力条件ではうまく造形できなかったため調整を行い、エクストルーダー出力温度140℃（通常220℃）、リトラクション距離1.8mmにすることで粗大な形態であれば形成可能であることを確認した。これを用いて耳介軟骨を人工皮弁で作成してみた。まずMRIを用いて耳介軟骨の3次元STLデータを作成し、PCLで出力してみたが、空間分解能が不十分なSTLデータであったためか良好な形態の再現は現時点では得られていないので、さらなる工夫が必要と考えられた。

前年度に引き続いて実験を行った。まず脂肪由来間葉系幹細胞を無細胞真皮マトリックス（ADM）に播種した組織の状態を電子顕微鏡を用いて評価した。走査型（SEM）は故障していたため、透過型（TEM）で撮影した。光学顕微鏡上での所見と同様に、真皮側に細胞の接着を認めるものの、表皮側への接着は乏しく、ADM表皮側と真皮側で生着の所見が異なることが分かった。以上、ADMをscaffoldとした脂肪由来間葉系幹細胞の播種、培養は可能であることが分かった。また３次元プリンター（システムクリエイト社製 Bellulo400）が使用できる環境が整ったため、本機を研究に取り入れて立体的な人工皮弁を作成する試みも行った。具体的には生体吸収性かつ3次元プリンターで出力が可能な素材でscaffoldを作成して、ここにADMを播種して生体内に埋入し、血管柄を付加してprefabricated flapと移植することを想定した。前述の条件を満たす素材としてPolycaprolactone（Facilan TM PCL 100 Filament、3D4Makers、Netherlands）を輸入し、３次元プリンターを用いて造形を行った。通常PLAに用いている3次元プリンターの出力条件ではうまく造形できなかったため調整を行い、エクストルーダー出力温度140℃（通常220℃）、リトラクション距離1.8mmにすることで粗大な形態であれば形成可能であることを確認した。これを用いて耳介軟骨を人工皮弁で作成してみた。まずMRIを用いて耳介軟骨の3次元STLデータを作成し、PCLで出力してみたが、空間分解能が不十分なSTLデータであったためか良好な形態の再現は現時点では得られていないので、さらなる工夫が必要と考えられた。