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新規ラミニン融合遺伝子による扁平上皮癌の集団浸潤の分子機序の解明

新型层粘连蛋白融合基因阐明鳞状细胞癌大规模侵袭的分子机制

基本信息

批准号：
21K09840
负责人：
越川直彦
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ラミニン融合遺伝子のコンディショナルトランスジェニック（cTg）マウスの作製の作製が完了し、今後の動物実験に必要なマウス数の準備を進めるとともに、アデノ随伴初ウイルスによるCre-loxpを異所的に発現させるための実験系の構築を行った。本年度、Cre-loxp-GFPを発現させるためのアドレの随伴ウイルス（AAV）が完成し、その感染実験を野生型マウス口腔内に投与し、AAV感染をGFPの発現での経時的に検証し、投与後７日後にはAAV感染によるGFPの蛍光が舌上皮、食道上皮、肺胞上皮等で確認された。現在、小数のTgマウスにCre-loxp-GFP-AAVを投与し、10、20週後に当該組織のH&E染色による上皮組織の変化を調べる予定である。また、Tgマウスから初代細胞の上皮細胞を単離して、in vitroにおけるラミニン融合遺伝子の発現が上皮組織の形態、機能に及ぼす影響を検討しているが、上皮組織由来のケラチノサイトの初代培養が成功していないため、マウス胎児由来の線維芽細胞を不死化したものを用いた解析を進めている。

ラミニン fusion heritage 伝 son のコンディショナルトランスジェニック (cTg) マウスの the の cropping system finished がし, future の animals be 験に necessary なマウス few の prepared を into めるとともに, アデノ over with early ウイルスによる Cre - loxp を vision of に発 now させるための be 験 is の line build をった. This year, Cre - loxp - GFP を発 now させるためのアドレの with accompanying ウイルス (AAV) がし, その infection be 験を wild-type マウスに cast with し, AAV infection in oral cavity を GFP の発 now での経 when に検し, cast with 7 days after には AAV infection による GFP の蛍 light が tongue epithelium, esophageal epithelium, Pulmonary cell epithelium, etc. で confirm された. Now, decimal の Tg マウスに Cre - loxp - GFP - AAV をに vote with し, 10 and 20 weeks later when the organization の H&E staining による epithelial tissue の variations change を adjustable べる designated である. Youdaoplaceholder0, Tg ウスらら primary cells <s:1> epithelial cells を単 isolated from てて, in Vitro におけるラミニン fusion posthumous son 伝の発 now が epithelial tissue にの form, function and ぼす influence を beg し検ているが, epithelial tissue origin のケラチノサイトの original training が success していないため, マウス tire where origin の line d を bud cells die change したものを with いた parsing を into めている.