权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Elucidation of the conserved mechanism of division plane determination in land plants

陆地植物划分面确定保守机制的阐明

基本信息

批准号：
20K06693
负责人：
幸節健
金额：
$ 2.75万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

動物、植物ともに、細胞がどの方向に分裂するかは、正常な発生に大きな影響を与える。申請者は基部陸上植物ヒメツリガネゴケにおいて細胞分裂面は中心体様構造を起点とした紡錘体軸の決定、細胞質分裂装置であるフラグモプラストの親細胞壁への適切なガイダンスによりなされることを見出した。本研究では、紡錘体軸の決定機構、細胞質分裂装置の親細胞壁へのガイダンス機構を調べることで、分裂面制御機構を解明することを目的とする。(1)ヒメツリガネゴケを用いて中心体様構造物の形成機構を解析。(2)真核生物に広く保存される細胞分裂に必須なAuroraキナーゼの解析。これらの解析で、紡錘体軸の決定、フラグモプラストの親細胞壁へのガイダンスメカニズムを明らかにすることを試みた。(1)の研究成果。RNA-seq法で同定済みの初期茎葉体で発現変動する遺伝子の中に、微小管の束化活性を有するMAP65dとMAP65eがあった。前年度にこれら遺伝子の解析を行い、二重変異体において野生型と比較して形態に異常は観察されず、細胞分裂面制御をしていないことが示唆された。そこで、もう一つ機能が重複する遺伝子としてMAP65fを想定し、この遺伝子の機能欠損変異株作製を試みた。(2)の研究成果。前年度にAuroraキナーゼの基質を同定するために、Auroraキナーゼにビオチンリガーゼ(BirA)を融合した遺伝子を持つ形質転換株を作製した。この形質転換体からタンパク質を抽出し、ウエスタンブロットによってビオチン化されたタンパク質を検出した。その結果、野生型のビオチン化されているタンパク質以外の分子量のタンパク質は検出されなかった。用いたビオチンリガーゼが大腸菌由来であるために、植物の生育温度が活性に必要な至適温度ではないと考えた。そこでビオチンリガーゼ活性の至適温度が改変されたTurboIDを取り寄せ、形質転換体を作製した。

Animal, plant, cell division direction, normal development, large impact The applicant has identified the origin of centrosome structure, determination of spindle axis, cytoplasmic division device, and appropriate cell wall structure of basal terrestrial plants. The purpose of this study is to clarify the regulation mechanism of spindle axis, cytokinesis mechanism and cytokinesis mechanism. (1)The formation mechanism of the central body structure is analyzed by using (2)Eukaryotic preservation requires Aurora analysis for cell division. The analysis, spindle axis determination, and cell wall mapping of the spindle axis are discussed in detail below. (1)Research results. RNA-seq method can be used to determine the activity of microtubule and microtubule bundle in the early stem and leaf. In the past, the analysis of the gene was carried out in the middle, the double variant was carried out in the wild type, the morphology was abnormal, and the cell division was controlled in the middle. The function of the system is repeated, and the function of the system is not improved. (2)Research results. Aurora The quality of the product is different from that of the product. The results show that the wild type has the same molecular weight as the wild type. The origin of coliform bacteria, the growth temperature of plants and the appropriate temperature TurboID is selected from the list of active and active components and is controlled by physical and chemical changes.