Development of a fully automated online simultaneous analysis method of steroid hormones and its application to metabolomics

全自动在线同步分析类固醇激素方法的建立及其在代谢组学中的应用

• 批准号: 20K07007
• 负责人: 片岡 洋行
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Shujitsu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07007/
• 关键词: ステロイドホルモン; 硫酸抱合体; ストレス; バイオマーカー; オンライン自動分析; 固相マイクロ抽出法; LC-MS/MS分析; 唾液; メタボロミクス; ストレス評価; インチューブ固相マイクロ抽出法; 液体クロマトグラフィー―タンデム質量分析法

令和4年度は、ストレス応答ステロイドホルモン類とストレス関連バイオマーカーのインチューブ固相マイクロ抽出(IT-SPME)／LC-MS/MSによるオンライン自動分析法を開発し、客観的ストレス評価に活用した。ストレスは様々な疾患発症の引き金となることから、ストレスに応答するコルチゾール（CRT）、テストステロン、デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）とその硫酸抱合体DHEASをIT-SPMEで濃縮し、ネガティブ／ポジティブイオンモードスイッチングLC－MS/MSと連結して同時分析する高感度オンライン自動分析システムを構築した。本法を非喫煙者及び喫煙者の唾液分析に応用したところ、タバコ煙曝露後CRT とDHEASレベルが低下してストレス軽減が認められたが、非喫煙者では曝露１時間後にこれらのレベルが増加に転じたことから、喫煙者では一時的ストレス抑制、非喫煙者ではストレス状態になることが分かった。一方、ストレス関連バイオマーカーとして、CRTの他セロトニン、メラトニン、ドーパミン、オキシトシンをIT-SPME／LC－MS/MS法により一斉分析する高感度オンライン自動分析システムを構築した。本法を用いて、ハーブティーやアロママスクによるストレス緩和効果を調べた結果、カモミールティーやジャスミンティーで摂取前後にCRTレベルが減少し、ラベンダー及びベルガモット精油でCRTレベルが減少したことからストレス緩和効果が認められた。また、クレペリンテストなどによる精神的な急性ストレス負荷によりCRTレベルが上昇するが、これら物質はCRTレベルを低下させ緩和効果を持つことが分かった。他のバイオマーカーは個人差があり明確な効果は認められなかった。以上より、開発した方法は選択的かつ高感度で非侵襲的に生体試料を分析できることから、ステロイドホルモン類によるストレス評価法としての有効性を確認した。

Reiwa 4th year は、Storm classトレスassociated バイオマーカーのインチューブsolid phase マイクロ pump De(IT-SPME)/LC-MS/MS automatic analysis method of automatic analysis method of をkai発し, customer's evaluation of ストレス価にutilization of した.ストレスは様々なDiseases and diseaseのciteき金となることから、ストレスに応answerするコルチゾール（ CRT), Tetsuta テロン, Tetsuta ドロエピアンドロステロン (DHEA) and sulfuric acid complex DHEASをIT-SPMEでconcentratedし、ネガティブ／ポジティブイオンモードスイッチングLC-MS/MS combines the simultaneous analysis of high-sensitivity high-sensitivity liquids and automatic analysis of high-sensitivity liquids. This method is suitable for saliva analysis of non-smokers and smokers. It can be used for CRT after cigarette exposure.とDHEAS レベルがlow してストレス軽 reduce が cognizance められたが, non-smoker では exposed for 1 time にこれらのレベルがAdded に転じたことから, smoker's では temporary ストレス suppression, non-smoker's ではストレス status になることが分かった. One party, ストレスassociated バイオマーカーとして, CRTのセロトニン、メラトニン、ドーパミン、オキシトシンをIT-SPME/LC-MS/MS method is a high-sensitivity high-sensitivity automatic analysis system based on the IT-SPME/LC-MS/MS method. This method is to be relaxed with いて, ハーブティーやアロママスクによるストレスThe result of the effect is the result of the adjustment, and the result of the adjustment is the result of the adjustment. After the CRT レベルが reduce the し, ラベンダー and びベルガモット essential oil でCRT レベルがreduce したことからストレスeasing effect がcognizeめられた.また、クレペリンテストなどによる Mental な acute ストレス load によりCRT レベルがRising するが, これらmatterはCRTレベルをloweringさせeasing effectをholdingつことが分かった. His personal difference is clear and the effect is clear. The above-mentioned methods are used to analyze high-sensitivity, non-invasive biological samples.とから, ステロイドホルモンkind によるストレスreview価法としてのeffectivenessをconfirmationした.

项目成果

唾液バイオマーカーのIn-tube SPME／LC-MS/MS分析に基づくハーブティーのストレス緩和及びリラックス効果の評価

基于唾液生物标志物的管内 SPME/LC-MS/MS 分析评估花草茶的缓解压力和放松效果

• 发表时间: 2023
• 作者: 本城明日香;片岡洋行
• 通讯作者: 片岡洋行

ポラリティ―スイッチングLC-MS/MSによるストレス関連カテコールアミン及び代謝物の高感度一斉分析法の開発

使用极性切换 LC-MS/MS 开发高灵敏度同时分析应激相关儿茶酚胺和代谢物的方法

• 发表时间: 2022
• 作者: 宮田早織;片岡洋行
• 通讯作者: 片岡洋行

インチューブSPME／LC－MS/MSによる硫酸化ステロイド代謝物の高感度分析法の開発

使用管内 SPME/LC-MS/MS 开发硫酸化类固醇代谢物的高灵敏度分析方法

• 发表时间: 2021
• 作者: 中山大輝;片岡洋行
• 通讯作者: 片岡洋行

オンラインインチューブSPME／LC－MS/MSによるステロイドホルモン類の高感度分析法の開発

使用在线管内 SPME/LC-MS/MS 开发类固醇激素的高灵敏度分析方法

• 发表时间: 2021
• 作者: 人見崇史;中山大輝;片岡洋行
• 通讯作者: 片岡洋行

Solid-Phase Microextraction and Related Techniques in Bioanalysis (Edited by H. Kataoka)

生物分析中的固相微萃取及相关技术（H. Kataoka 编辑）

• 发表时间: 2023
• 作者: Yuki Komori;Ryuta Muromoto and Tadashi Matsuda;Hiroyuki Kataoka
• 通讯作者: Hiroyuki Kataoka